Nano-Glo® Luciferase Assay Systemとは?
Nano-Glo® Luciferase Assay Systemは、深海エビの一種である Oplophorus gracilirostris に由来し、人工的に改変された19.1kDaの単量体酵素NanoLuc®ルシフェラーゼ専用の検出試薬です。Nano-Glo® Luciferase Assay Substrateを使用して、バックグラウンドが低く、明るく安定したATP非依存性のグロー型発光を生成します。これにより、細胞ベースアッセイで高感度な検出が可能です。分子生物学、細胞シグナル、遺伝子発現、創薬スクリーニング、タンパク質間相互作用の研究など、幅広い用途に利用されています。
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- ハイエンドなレポータシステム:発光量の高いNanoLuc®レポーターはより感度が求められる難しい実験用途に使用可能
- 最適化が容易:添加して測定するだけのシンプルな操作性によりHTSへの変更が容易
- 測定精度の改善:溶解操作と試薬の添加操作を分ける必要はありません
- より明るく長い発光時間:バッチ操作あるいは連続操作に最適化
- 自己発光の低減:低いバックグラウンドを実現する試薬組成により感度が向上
【ライセンス】Nano-Gloライセンスプログラム
【日本語簡易マニュアル】Nano-Glo Luciferase Assay System日本語簡易マニュアル
※日本語マニュアルは英語版を翻訳したものですが、常に更新されるものではありません。最新のマニュアルについては英語版(”Product Resources”タブ → “Protocols”)をご覧ください。
Nano-Glo® Luciferase Assayの測定原理
Nano-Glo® Luciferase Assayは、シンプルな「添加して測定」するプロトコルを採用しています。まず、Nano-Glo® Luciferase Assay SubstrateとNano-Glo® Luciferase Assay Bufferを混合し、測定用試薬を調製します。この試薬は細胞を溶解すると同時にNanoLuc® Luciferaseの基質を供給するため、別途細胞を溶解する必要はありません。
調製した試薬をNanoLuc® Luciferase発現サンプルに添加すると、発光反応によって安定したシグナルが生じます。標準的な組織培養培地中での発光半減期は約120分であり、十分な測定時間を確保できます。
発光シグナルは、標準的なプレートリーダーまたはルミノメーターで測定できます。発光量は、100万倍のダイナミックレンジにわたってNanoLuc® Luciferase濃度に比例するため、わずかな変化から高発現サンプルまで検出できます。
シンプルな「添加-混和-測定」プロトコル
- 調製したNano-Glo® Luciferase Assay Reagentを、細胞または培養上清に直接添加
- 短時間の混和
- 標準的なプレートリーダーまたはルミノメーターによる発光測定
Nano-Glo® Luciferase Assayの特長
- 高感度:ホタルルシフェラーゼまたはRenillaルシフェラーゼより約100倍明るいNanoLuc® Luciferaseと、基質の低い自己発光による優れたシグナル/バックグラウンド比
- 安定したグロー型シグナル:約120分の発光半減期による、インジェクター不要のバッチ処理
- シンプルな「添加-混和-測定」ワークフロー:細胞溶解成分を含む試薬による、別途の溶解工程やインジェクション操作の省略と1536ウェルフォーマットへの対応
- 広いダイナミックレンジ:100万倍にわたる直線的なダイナミックレンジ
本製品の大容量注文については、カスタム製造サービスをご覧ください。
プロトコル
製品仕様
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
| Nano-Glo® Luciferase Assay Buffer | N112A | 1 × 10ml |
| Nano-Glo® Luciferase Assay Substrate | N113A | 1 × 200μl |
BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.
Researcher may use this product for research use only; no commercial use is allowed. Commercial use means any and all uses of this product by a party in exchange for consideration, including, but not limited to (1) use in further product manufacture; (2) use in provision of services, information or data; and (3) resale of the product, whether or not such product is resold for use in research. Researcher shall have no right to modify or otherwise create variations of the product. No other use or transfer of this product is authorized without the prior express written consent of Promega.
For uses of Nano-Glo®-branded reagents intended for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer) to acceptors other than a genetically encoded autofluorescent protein, researchers must:
(i) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity by this product; or
(ii) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays to energy acceptors not manufactured by Promega.
With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic, prophylactic or commercial uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE, WITH REGARD TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA.
U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
| Nano-Glo® Luciferase Assay Buffer | N112B | 1 × 100ml |
| Nano-Glo® Luciferase Assay Substrate | N113B | 2 × 1ml |
BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.
Researcher may use this product for research use only; no commercial use is allowed. Commercial use means any and all uses of this product by a party in exchange for consideration, including, but not limited to (1) use in further product manufacture; (2) use in provision of services, information or data; and (3) resale of the product, whether or not such product is resold for use in research. Researcher shall have no right to modify or otherwise create variations of the product. No other use or transfer of this product is authorized without the prior express written consent of Promega.
For uses of Nano-Glo®-branded reagents intended for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer) to acceptors other than a genetically encoded autofluorescent protein, researchers must:
(i) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity by this product; or
(ii) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays to energy acceptors not manufactured by Promega.
With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic, prophylactic or commercial uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE, WITH REGARD TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA.
U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
| Nano-Glo® Luciferase Assay Buffer | N112A | 10 × 10ml |
| Nano-Glo® Luciferase Assay Substrate | N113A | 10 × 200μl |
BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.
Researcher may use this product for research use only; no commercial use is allowed. Commercial use means any and all uses of this product by a party in exchange for consideration, including, but not limited to (1) use in further product manufacture; (2) use in provision of services, information or data; and (3) resale of the product, whether or not such product is resold for use in research. Researcher shall have no right to modify or otherwise create variations of the product. No other use or transfer of this product is authorized without the prior express written consent of Promega.
For uses of Nano-Glo®-branded reagents intended for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer) to acceptors other than a genetically encoded autofluorescent protein, researchers must:
(i) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity by this product; or
(ii) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays to energy acceptors not manufactured by Promega.
With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic, prophylactic or commercial uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE, WITH REGARD TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA.
U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
| Nano-Glo® Luciferase Assay Buffer | N112B | 10 × 100ml |
| Nano-Glo® Luciferase Assay Substrate | N113C | 5 × 4ml |
BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.
Researcher may use this product for research use only; no commercial use is allowed. Commercial use means any and all uses of this product by a party in exchange for consideration, including, but not limited to (1) use in further product manufacture; (2) use in provision of services, information or data; and (3) resale of the product, whether or not such product is resold for use in research. Researcher shall have no right to modify or otherwise create variations of the product. No other use or transfer of this product is authorized without the prior express written consent of Promega.
For uses of Nano-Glo®-branded reagents intended for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer) to acceptors other than a genetically encoded autofluorescent protein, researchers must:
(i) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity by this product; or
(ii) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays to energy acceptors not manufactured by Promega.
With respect to any uses outside this label license, including any diagnostic, therapeutic, prophylactic or commercial uses, please contact Promega for supply and licensing information. PROMEGA MAKES NO REPRESENTATIONS OR WARRANTIES OF ANY KIND, EITHER EXPRESSED OR IMPLIED, INCLUDING FOR MERCHANTABILITY OR FITNESS FOR A PARTICULAR PURPOSE, WITH REGARD TO THE PRODUCT. The terms of this label license shall be governed under the laws of the State of Wisconsin, USA.
U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.
よくあるご質問
Nano-Glo® Luciferase Assayは分泌型NanoLuc® Luciferaseの測定に使用できますか?
はい。Nano-Glo® Reagentを培養上清へ直接添加することで、細胞を溶解せずに分泌型NanoLuc® Luciferaseを検出できます。そのため、分泌型レポーターアッセイのモニタリングや、同じ培養系から経時的にサンプリングする実験に適しています。
このアッセイには、インジェクター付きルミノメーターが必要ですか?
いいえ。Nano-Glo® Luciferase Assayは、発光半減期が約120分の安定したグロー型シグナルを生成するため、インジェクターや高速測定装置は必要ありません。GloMax® Discover Systemをはじめ、発光を検出できる標準的なマイクロプレートリーダーまたはルミノメーターを使用できます
他のルシフェラーゼアッセイと比べて、Nano-Glo® Luciferase Assayの感度はどの程度ですか?
NanoLuc® Luciferaseは、ホタルルシフェラーゼまたはRenillaルシフェラーゼと比べて約100倍強い発光を示します。さらに、Nano-Glo® Luciferase Assay Substrateは自己発光が低いため、従来のルシフェラーゼシステムでは十分なシグナル/バックグラウンド比が得られないような低レベルのレポーター発現も検出できます。
Nano-Glo® Luciferase AssayをBRET実験に使用できますか?
Nano-Glo® Luciferase Assay Systemは、標準的な溶解式エンドポイントアッセイ用に設計されています。BRETおよびNanoBRET®アプリケーションには、生細胞でのエネルギー移動測定用に最適化されたNanoBRET® Nano-Glo® Detection Systemsをご利用ください。
Nano-Glo® Luciferase Assayを生細胞実験に使用できますか?
Nano-Glo® Luciferase Assay Systemは、標準的な溶解式エンドポイントアッセイ用に設計されています。細胞を溶解せずに生細胞でNanoLuc®を検出する場合は、Nano-Glo® Live Cell Assayをご利用ください。
Nano-Glo® Luciferase Assayはハイスループットスクリーニングに対応していますか?
はい。試薬を1回添加するだけでインジェクターを必要とせず、シグナルが長時間安定するため、バッチ処理および連続処理によるHTSワークフローに適しています。個別のチューブから384ウェルおよび1536ウェルプレートまで、さまざまなスケールに対応します。
技術資料
技術記事
- Enhanced extrinsic apoptosis of therapy-induced senescent cancer cells using a death receptor 5 (DR5) selective agonist
- Enhancing anti-EGFRvIII CAR T cell therapy against glioblastoma with a paracrine SIRPγ-derived CD47 blocker
- This study sought to the effect of branched chemically modified poly(A) tails on enhancing mRNA stability and translation capacity.
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