CellTiter 96® Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTT)

CellTiter 96®Assayは、比色定量法を利用した非放射性の生細胞測定システムで、[3H]チミジンの取り込みによる細胞増殖試験に置き換わる迅速で簡便なアッセイが行えます。この方法はMosmannの報告の改良法であり、テトラゾリウム塩(MTT)が生細胞によって青色のホルマザン産物に変換される反応に基づきます。96ウェルプレートリーダーを用いて570nmで測定すれば、この生成物を容易に測定できます。このシステムには複数の改良点が含まれ、従来の技術的問題が低減されました。低減された内容は、1)有機溶媒添加に起因する血清タンパク質の沈殿、2)フェノールレッドによる干渉、3)感度低下の原因となるホルマザン結晶の不完全な溶解、4)呈色産物の安定性に関する問題です。さらに、複数サンプルで増殖因子濃度を決定するために、[3H]チミジンの取り込みとテトラゾリウム変換の2種類のアッセイを行い、直接比較したところ、これら2法の相関関係は5%以下の違いしか認められませんでした。

   
• 迅速：細胞の洗浄や回収、シンチレーション測定が不要で、96ウェルプレートでそのままアッセイが行えます。
• 高感度：96ウェルプレートで1,000個/ウェルの細胞を検出（ニュートラルレッドアッセイよりも極めて高感度）。
• 汎用性：哺乳動物、植物、酵母の各種細胞でアッセイ可能。
• 柔軟性：4時間プロトコルと一晩プロトコルを選択でき ます。
• 簡便：発色溶液の調製（計量や撹拌/溶解）が不要です。
• 非放射性：シンチレーションカクテルや放射性物質の廃棄処理が不要です。

 

• 細胞増殖試験
• 細胞接着試験
• 細胞障害試験 
• 走化性試験
• アポトーシス 

 Protocols & Applications Guide もご覧ください。

【Q&A】CellTiter 96 Non-Radioactive Cell Proliferation Assay (MTT)

1. Mosmann, T. (1983) J. Immunol. Meth. 65, 55–63.
2. Tada, H. et al. (1986) J. Immunol. Meth. 93, 157–65.