細胞死からの回避

細胞生存性試験は生細胞を検出し、がん細胞の増殖に対する薬剤処理の影響を測定することができます。

このビデオでは細胞ベースアッセイで使用する細胞の培養およびプレーティング法を見ることができます。

細胞毒性試験は死細胞を検出し、細胞ベーススクリーニングで抗がん剤の細胞毒性効果を測定することができます。

アポトーシスは過剰増殖と関連するがん遺伝子のシグナリングやDNAダメージのレベルを増加させることでがん細胞に誘導することができます。しかし、がんはアポトーシスを回避する能力も身に着けており、悪性化や治療耐性を獲得する結果につながります。

がんなど栄養制限によるストレスを受けた状態では、オルガネラを分解してこれらの細胞成分を生合成あるいはエネルギー代謝にリサイクルするためにオートファジーが誘導されます。オートファジーはがん細胞の様態に対して逆の作用を与えることもあり、いくつかのケースでは進行するアポトーシスからがんを防御するがんの生存機構として働くこともあります。またあるケースではオートファジーはアポトーシスを誘導してがん細胞を殺す場合もあります。

シンプルでホモジニアスな オートファジーアッセイ  を用いて、発光プレートリーダーで2Dまたは3D培養モデルにおけるオートファジーフラックスのモジュレータースクリーニングを行うことができます。

3D 培養では外側から内側に向かって酸素、栄養の濃度勾配ができているため、2D培養よりも組織あるいはがんの環境に近い状態が作り出されています。その結果、3D培養系は抗がん剤開発のモデル系をして選ばれるようになっています。3D培養では攪拌やインキュベーション時間を延長するなど 2Dのアッセイプロトコルを最適化する必要ができてきます。最近では 3Dば細胞培養用にと特別にデザインされたアッセイも利用できるようになりました。