Lactate-Glo™ Assay
Quick, Sensitive Lactate Assay for a Variety of Biological Samples
- Perform in high-throughput workflows
- Multiplex with other metabolite or viability assays
- Linear lactate detection range up to 200µM
Catalog Number:
Size
Catalog Number: J5021
Catalog Number: J5022
様々なサンプルより高感度、迅速に乳酸を検出
Lactate-Glo™ Assay は生物学的サンプルより迅速、選択的、高感度にL- 乳酸を検出する発光アッセイです。乳酸はグルコース恒常性やエネルギー生産に応答する主要な代謝経路である解糖系により生成されます。これまで単なる解糖系の副産物であると考えられてきましたが、現在はがんの発生、糖尿病およびその他の疾患に関わる中間代謝の重要な調節分子であると考えられています。
測定原理
The Lactate-Glo™ Assay は乳酸の酸化とそれにより生成される NADH を発光 NADH 検出システムで測定します。乳酸脱水素酵素が乳酸とNAD+を用いてピルビン酸と NADHを産生します。この NADH 存在下でルシフェリン前駆体基質はレダクターゼによりルシフェリンに変換され Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase の基質となり発光します。Lactate-Glo™ Assay には、哺乳動物細胞にみられる主要な立体異性体 L-乳酸に対する特異性を持つ L-乳酸選択性乳酸脱水素酵素が含まれます。
乳酸脱水素酵素 (LDH)、NAD+、レダクターゼ、レダクターゼ基質およびルシフェラーゼを含む Lactate Detection Reagent を乳酸を含むサンプルに等量加えると酵素カップリング反応が同時に起こります。発光シグナルはサンプルに含まれる乳酸量に比例し、すべての乳酸が消費されるまで増加し、それから発光シグナルは安定します。
ご希望の処理量とワークフローに適応します！
The Lactate-Glo™ Assay は柔軟性の高いシステムで、ハイスループットフォーマット (6) も可能で、多くのサンプル種にも対応します（リニアレンジにフィットさせるために希釈などの前処理が必要な場合もあります）。また、内在性の酵素活性の不活化、除タンパク質および NAD(P)H 分解などが必要な場合もありますが、これらの処理を簡便に行う96- および 384 ウェルプレートに対応した方法を提供しており、サンプルの遠心やスピンカラムも使用しません。
発光シグナルはサンプル中の乳酸量と比例
A549 細胞による乳酸の分泌
利点
様々なサンプル種より迅速に代謝物を測定: 培地、細胞、組織および血漿より測定可能。最小限のサンプル調製ステップだけで、遠心やスピンカラムは不要
細胞内の乳酸検出はウェル内で簡便に調製
広いダイナミックレンジ: 3桁までの直線性を有しているのでサンプル測定が容易
わずかな変化でも検出: S/Bmax > 200 のアッセイウインドウを持つので発色法や蛍光法によるアッセイよりもわずかな代謝物レベルの変化を検出
サンプルあたりの情報量を最大限に: 同じサンプルより複数の代謝物を測定でき、細胞生存性試験とのマルチアッセイで補正することも可能
1つのサンプルより複数の代謝産物を測定 !
細胞内のエネルギー状態で重要な4種類の代謝産物 — グルコース、乳酸、グルタミン酸およびグルタミンを発光アッセイ Glucose-Glo™、Lactate-Glo™、 Glutamine/Glutamate-Glo™ および Glutamate-Glo™ Assay で同時並行で測定することができます。 これら4種の発光アッセイすべてにサンプル処理が対応するため4種すべての代謝物を同一サンプルより検出することができます。これらのサンプル種には培地、血漿、血清および組織などが含まれます。以下のデータは Technical Manual TM494 に従い、同じ培養細胞より取得した培地サンプルを用いて代謝産物を測定したものです。
FAQs
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Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
Reductase |
G884A | 1 × 55μl | 6mg/ml |
Reductase Substrate |
G885A | 1 × 55μl | |
Luciferin Detection Solution |
J135A | 1 × 5ml | |
NAD |
J136A | 1 × 30μl | |
Lactate |
J137A | 1 × 50μl | |
Lactate Dehydrogenase |
J195A | 1 × 1 each |
U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
Reductase |
G884B | 1 × 275μl | 6mg/ml |
Reductase Substrate |
G885B | 1 × 275μl | |
Luciferin Detection Solution |
J135B | 1 × 50ml | |
NAD |
J136B | 1 × 275μl | |
Lactate |
J137A | 1 × 50μl | |
Lactate Dehydrogenase |
J195A | 1 × 1 each |
U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.
Resources
技術記事
- Metabolite Measurements in Brain Organoid Media on the Hamilton MagEx STAR Application Note
- High-pressure oxygen rewires glucose metabolism of patient-derived glioblastoma cells and fuels inflammasome response
- This study sought to the effect of branched chemically modified poly(A) tails on enhancing mRNA stability and translation capacity.
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