P450-Glo™ CYP1B1 Assay System

P450-Glo™ CYP 1B1 Assay は発光法を利用してシトクロムP450 CYP 1B1 活性を測定するホモジニアスタイプのシステムです。このアッセイはルシフェラーゼ酵素の基質である甲虫ルシフェリンの誘導体である発光 P450 基質を採用しています。この誘導体は P450 により ルシフェリンに変換されることでルシフェラーゼの基質となり、 P450 活性に比例した発光を生じます。

この発光アッセイは非常に高感度でバックグラウンドも低く、広いダイナミックレンジを示します。P450の基質であるルシフェリン誘導体と安定化された組換えルシフェラーゼ (Ultra-Glo Luciferase) および特殊なバッファーシステムにより ”グロータイプ (長時間発光)” の発光シグナルを生じます。発光半減期は 2時間以上なのでインジェクターを備えたルミノメーターを使用する必要はなく、プレートのバッチ処理も可能です。発光測定フォーマットなので時間のかかる HPLC などの分析に比べ非常に簡便です。

ルシフェリンベースの基質は細胞内へ取り込まれ、約3時間のインキュベーションでルシフェリンに変換されます。シトクロム P450 阻害剤スクリーニングにおいて被験物質のルシフェラーゼ阻害による偽陽性も最小限に抑えられており、96- または 384-ウェルプレートフォーマットで得られる Z´ 値は 0.8 以上で信頼性の高い測定が可能です。

このアッセイには発光性 P450 基質、発光検出試薬、バッファーなどが含まれています。