Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay

Apo-ONE®Homogeneous Caspase-3/7 Assayはカスパーゼ3および7の活性を迅速で感度よく検出する、ホモジニアスフォーマットの試薬です。この試薬には蛍光前駆基質,bis-(N-CBZ-L-aspartyl-L-glutamyl-L-valyl-aspartic acid amide)rhodamine 110(Z-DEVD-rhodamine 110)および哺乳動物細胞を効率よく溶解する働きとカスパーゼ3/7の活性を最適化する2つの機能を持つバッファーから構成されます。定量を行うには、まず基質をバッファーで溶解し、Homogeneous Caspase-3/7 Reagentを調製します。この試薬を直接サンプルに加え、軽く混和し、必要な時間インキュベートを行った後、蛍光プレートリーダーで測定します（励起波長498nm、最大蛍光波長521nm）。カスパーゼ3/7活性によりDEVDペプチド基質のアスパラギン酸残基のC末端側が連続して切断され、クエンチング-ペプチドが除去されると遊離したrhodamine 110が蛍光を発します。蛍光産物量はサンプルに存在するカスパーゼ3/7活性量に比例します。カスパーゼ3/7定量には精製された酵素や細胞抽出液、培養細胞（付着細胞・浮遊細胞・初代培養細胞）をサンプルとして使用します。この定量試薬はフレキシブルでハイスループットシステムにも対応します。

• 迅速：シンプルな“添加-混和-測定”形式で面倒なサンプル調製や長いインキュベーションも不要
• ホモジニアス：1種類の試薬を添加するだけなのでHTSに最適
• 高感度：微量のカスパーゼ3/7活性を検出できるので少数の細胞でも検出可能
• 柔軟性：スケールが自在（キュベットから384プレート）で、その他のセルベースアッセイとのマルチアッセイが可能
• マルチアッセイ：細胞増殖試験 (CellTiter-Blue® Assay; Cat.# G8080)、カスパーゼ8,9アッセイ(Caspase-Glo® 8 または 9 Assays (Cat.# G8200 または G8210).) など他のセルベースアッセイとのマルチアッセイが可能
• 自動化: 確認済みの自動化法については www.promega.com/automethods/  をご覧ください。
• カスタマイズ: カスタムオプションについては www.promega.com/custom/　をご覧ください。

Protocols & Applications Guideもご参照ください。

【Q&A】Apo-ONE Homogeneous Caspase-3/7 Assay

【パフォーマンス】AMC基質との感度比較とアポトーシス誘導剤 ED50 の決定   製品概説

【アプリケーション】強力なハイスループット アポトーシツ検出法ルシフェラーゼ   アポトーシスを包括的に研究する手法

ホモジニアスなセルベースアッセイを用いたマルチアッセイ   セルベースマルチアッセイの自動化

【ガイド】実験に即したセルベースアッセイの選び方

Using 100μl of Apo-ONE® Reagent per assay in a 96-well format, Cat.no G7792 provides sufficient reagents to perform 10 assays; Cat.no G7790, 100 assays; Cat.no G7791, 1,000 assays. Using 25μl of Apo-ONE® Reagent per assay in a 384-well format, Cat.no G7792 provides sufficient reagents to perform 40 assays; Cat.no G7790, 400 assays; Cat.no G7791, 4,000 assays.