CellTiter-Glo® One Solution Assay は、培養中の生細胞数をATP量に基づいて定量するホモジニアスな手法であり、代謝的に活性な細胞の存在を示す指標としてATPを利用します。この凍結済み・すぐに使えるフォーマットは、従来のCellTiter-Glo® Luminescence Cell Viability Assay のケミストリーに基づいており、試薬調製時にバッファーと凍結乾燥基質を混合する必要がありません。CellTiter-Glo® Assay はマルチウェルプレートフォーマットに対応しており、96ウェルから1536ウェルまでの自動化ハイスループットスクリーニング(HTS)や、細胞増殖および細胞毒性アッセイに最適です。
本アッセイは、ホモジニアスな「添加 - 混和 - 測定」形式により細胞を溶解し、ATP量に比例した発光シグナルを生成します。ATP量は培養中の細胞数に直接比例するため、発光量は生存細胞数の指標となります。CellTiter-Glo® One Solution Assay は、半減期が3時間を超える安定した「グロータイプ」の発光シグナルを生成します。この長時間持続する発光により、試薬インジェクターが不要となり、複数プレートを連続またはバッチ処理で柔軟に測定することができます。
試薬の調製は不要で、解凍して「添加 - 混和 - 測定」するだけで使用できます。このフォーマットにより、プレートの取り扱い工程が削減されます。試薬添加から10分後にはデータの取得が可能であり、標準的な比色法や蛍光法の検出限界を下回る細胞数でも測定が可能です。
本アッセイはHTS用途に適した容量で提供されており、96ウェルプレートはもちろん、標準または低容量の384ウェル、1536ウェルプレートなど、さまざまなマルチウェルフォーマットで使用できます。測定データは、ルミノメーターまたはCCDカメラ搭載のイメージング装置により取得できます。
CellTiter-Glo® Assay は、細胞種および培地条件に依存して、半減期が3時間を超える安定した発光シグナルを提供します。また、プロメガの他の非溶解型アッセイケミストリーと併用することができます。
備考
カタログ番号G8461 および G8462 の使用目安は以下のとおりです:
G8461:96ウェルプレートで100µl/アッセイ使用する場合に約1,000アッセイ分、384ウェルプレートで25µl/アッセイ使用する場合に約4,000アッセイ分
G8462:96ウェルプレートで100µl/アッセイ使用する場合に約5,000アッセイ分、384ウェルプレートで25µl/アッセイ使用する場合に約20,000アッセイ分
Cell number correlates with luminescent output.
CellTiter-Glo® One Solution Assay で得られる発光量と培養中の細胞数との間には、3桁のダイナミックレンジにわたって直接的な相関が認められる。Jurkat細胞をRPMI 1640培地(10% FBS含有)中で2倍系列希釈し、自動分注装置を用いて3種類のフォーマットに分注した。分注量は、96ウェルプレート(パネルA)では100µl/ウェル、384ウェル低容量プレート(パネルB)では10µl/ウェル、1536ウェルプレート(パネルC)では4µl/ウェルとした。各ウェルに等量のCellTiter-Glo® One Solutionを添加し、10分後に発光を測定した。いずれのフォーマットにおいても、発光シグナルと細胞数との間に高い直線性(r² > 0.99)が確認された。
Protocols
Specifications
Catalog Number:
SDS
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使用制限
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.保存条件
The CellTiter-Glo® One Solution Assay can also be stored at 4°C for 48 hours or at 22°C for 10 hours with ~10–12% loss of activity and can withstand two additional freeze-thaw cycles after the first thaw, with approximately 10% loss of activity with each additional freeze-thaw cycle.
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使用制限
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.保存条件
The CellTiter-Glo® One Solution Assay can also be stored at 4°C for 48 hours or at 22°C for 10 hours with ~10–12% loss of activity and can withstand two additional freeze-thaw cycles after the first thaw, with approximately 10% loss of activity with each additional freeze-thaw cycle.