CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assay
実績ある発光技術を用いて相対的な死細胞数を測定する
CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assayは、細胞集団中の死細胞数を測定するための発光アッセイシステムです。このアッセイは膜が損傷した細胞から放出された特定の細胞内プロテアーゼ(死細胞プロテアーゼ)の細胞外活性を測定します。本製品に含まれる発光性の細胞非透過性ペプチド基質(AAF-aminoluciferin)を使用して、死細胞由来プロテアーゼ活性を測定します。遊離したアミノルシフェリンは、アッセイ試薬に含まれるUltra-Glo™ Recombinant Luciferaseにより生じるグロータイプの発光として測定されます。AAF-aminoluciferin substrateは、生細胞のインタクトな細胞膜は透過できないため、生細胞集団からシグナルは生じません(検出限界以下)。
本製品に添付される細胞溶解剤を使用することで、CytoTox-Glo™ Assayは各アッセイウェル内の総細胞数に応じた発光シグナルを得ることも可能です。生存率は、総細胞数の発光値シグナルから死細胞の発光シグナルを差し引くことで計算でき、これによりアッセイデータを細胞数に正規化し、誤った結論を導く可能性のあるアッセイ干渉を軽減できます。細胞毒性プロテアーゼバイオマーカーは細胞株全体で構成的かつ保存されており、CytoTox-Glo™ アッセイは他の細胞生存率評価方法と優れた相関を示します。
- 培養中の死細胞を測定:1種類の試薬を添加するだけのホモジニアスな“添加-混和-測定”プロトコル。
- 生存性における微小な変化も検出:直線的な応答性を備え、生存性の微小な変化も検出でき、軽度(100~95%生存性)から重度(5~0%生存性)の細胞毒性に対応。
- 細胞毒性による補正:死細胞数によるデータ補正は、ウェル間、プレート間および測定日間での比較を容易にします。
- 全溶解プロトコルによる残存する生細胞数の測定:生細胞の減少による裏付けにより、細胞毒性の相関性が向上。
- データの改善:擬陽性(または擬陰性)の統計的確率が低下し、安定な発光測定により蛍光物質による干渉問題を排除。
用途
- 細胞毒性の測定
- 総細胞数の測定
- 生存性および毒性のマルチアッセイ
【アプリケーション】細胞生存性試験、カスパーゼアッセイおよびレポーターアッセイを組み合わせたマルチアッセイ
【インフォメーション】細胞生存性、細胞毒性検出のための新しいバイオマーカー
【パフォーマンス】製品概説
【簡易プロトコール】CytoTox-Glo™
より優れた感度
CytoTox-Glo™ Assayは、その優れた感度により生存率の小さな変化も検出します。このグラフは、蛍光LDHアッセイと比較した場合のCytoTox-Glo™ Assayの優れたシグナル / ノイズ比を示しています。10,000細胞の総集団の中で200~500の細胞毒性細胞、および希釈系列で10未満の細胞毒性細胞を検出します。
より信頼性の高いデータ
細胞毒性および溶解剤を用いた細胞生存率の測定。細胞溶解後に得られる発光シグナルは初期の死細胞シグナルを差し引くことで「生細胞」の寄与を反映します。上記のデータはカルシウムイオノフォア濃度に対する「死細胞」または「生細胞」シグナルとしてプロットされています。
Notes
96wellプレートフォーマット(1wellあたり100μl使用)の場合、Cat.# G9290 は100アッセイ、Cat.# G9291は500アッセイ、Cat.# G9292は1,000アッセイに十分な試薬が含まれています。384wellプレートフォーマット(1wellあたり25μl使用)の場合、Cat.# G9290 は400アッセイ、Cat.# G9291は2,000アッセイ、Cat.# G9292は4,000アッセイに十分な試薬が含まれています。
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146A | 2 × 5ml |
AAF-Glo™ Substrate |
G607A | 1 × 1 bottle |
|
Digitonin |
G944A | 1 × 40μl |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146A | 10 × 5ml |
AAF-Glo™ Substrate |
G607A | 5 × 1 bottle |
|
Digitonin |
G944B | 1 × 175μl |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Assay Buffer |
G146B | 4 × 25ml |
|
AAF-Glo™ Substrate |
G607B | 2 × 1 bottle |
|
Digitonin |
G944B | 2 × 175μl |
Resources
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