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Ki-67 検出のためのウォッシュ不要アッセイ

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Catalog Number: CS3076A01

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「添加・混合・測定」アッセイにより、2時間以内に細胞増殖を評価

細胞増殖は細胞ベースの研究の基本的なパラメーターです。研究者は現在、代謝の変動に影響を受ける方法を用いて細胞増殖をモニターしており、煩雑な洗浄ステップが必要であったり、増殖の間接的なマーカーであったり、放射性物質、特殊な装置を使用するなどしています。

Lumit® hKi-67イムノアッセイは、細胞増殖の指標としてよく知られているKi-67を追跡するための簡単な添加・混合・測定のプレートベースのアッセイで、洗浄ステップや特殊な検出装置は不要です。発光プレート-リーダー(ルミノメーター)があれば測定可能です。

このアッセイを使用することで、研究者はより高い信頼性を持つデータを生成し、準備作業と結果までの時間を短縮することができます。

Lumit® hKi-67 Immunoassay の仕組み

Ki-67に対する一次抗体は、その特異的かつ感度の高い検出のために選択され、NanoBiT®ルシフェラーゼのLgBiTおよびSmBiTサブユニットで標識されています。Ki-67の存在下で、サブユニットは結合して活性ルシフェラーゼ酵素を形成します。最適化された基質を追加すると、Ki-67レベルに比例した明るい発光シグナルが生成されます。
Illustration showing how the Lumit® hKi-67 Immunoassay works.

シンプルなワンプレートプロトコル、洗浄ステップなし!

Illustration of the Lumit® hKi-67 Immunoassay protocol.

Lumit® hKi-67検出の広いダイナミックレンジと特異性

Lumit® hKi-67 Immunoassayの広い線形検出範囲は、ほとんどの細胞モデルで予想されるKi-67レベルをカバーし、Ki-67検出に特異的です。
Line graph showing the specificity of the Lumit® hKi-67 Immunoassay detection.
Line graph showing the broad linear range of the Lumit® hKi-67 Immunoassay.

細胞増殖の減少を測定

Treatment of HCT 116 cells with nutlin-3A did not induce cytotoxicity, as determined using fluorescent CellTox™ Green Assay.
24 hours after treatment with nutlin-3A, Ki-67 expression is reduced in HCT 116, along with reduced viable cell number, which was assessed using the Lumit® hKi-67 Immunoassay and CyQuant™ Direct assay, respectively.
48 hours after treatment with nutlin-3A, Ki-67 expression is reduced in HCT 116, along with reduced viable cell number, which was assessed using the Lumit® hKi-67 Immunoassay and CyQuant™ Direct assay, respectively.
HCT 116細胞(10,000細胞/ウェル、96ウェルプレート)を抗増殖剤nutlin-3Aの濃度を増加させて処理したところ、細胞毒性は誘発されず、Ki-67発現レベルが濃度依存的に減少しました。Ki-67レベルはLumit® hKi-67 Immunoassayで評価され、生存細胞数の変化は並行するアッセイプレートでCyQUANT™ Directを使用して測定されました。

細胞増殖の増加を測定

Treatment of CD8+ T cells with IL-2; a CD3/CD28 T Cell activator reveals only modest T cell proliferation.
Treatment of CD8+ T cells with IL-2; a CD3/CD28 T Cell activator reveals significant upregulation of Ki-67, as measured using the Lumit® hKi-67 Immunoassay.
ヒトCD8+ T細胞(StemCell Tech)は、80,000細胞/ウェルでプレートされ、CD3/CD28 T細胞活性化剤を10ng/mlのIL-2あり(オレンジ)およびなし(青)で48時間処理されました。Lumit® hKi-67ImmunoassayでKi-67のアップレギュレーションがT細胞増殖(活性化後72時間以上経過してから開始)前に観察され、このアッセイが増殖の早期指標として使用できることを示しています。

抗増殖効果と細胞死を区別する

Lumit® hKi-67 Immunoassayを使用して、細胞増殖の主要なマーカーであるhKi-67の検出を行い、迅速かつ簡単に細胞増殖を評価します。このアッセイは均一な細胞ベースのアッセイです。
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Image of scientific poster.

ブログ記事: 細胞増殖アッセイの再考

革新的なLumit® hKi-67 Immunoassayは、細胞の代謝状態に依存しないマーカーを追跡し、研究者が増殖の評価に対してより高い信頼を持つことを可能にします。
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プロトコル

No protocols available

仕様

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選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate C

CS3076A02 1 × 480μl

Lumit® Immunoassay Buffer C (10X)

CS3076A03 1 × 1.8ml

Lumit® Lysis Buffer II (10X)

CS3076A04 1 × 1.3ml

Human Ki-67 Protein, Partial

CS3076A05 1 × 25μl

Anti-hKi-67 mAb-LgBiT, 400X

CS3076A06 1 × 60μl

Anti-hKi-67 mAb-SmBiT, 400X

CS3076A07 1 × 60μl

CellTox™ Green Dye, 1,000X

G873A 1 × 20μl

分析証明書

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保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.