MultiTox-Fluor Multiplexed Cytotoxicity Assayは１液タイプのホモジニアス蛍光アッセイシステムで、培養細胞における生細胞および死細胞を同時に測定することができます。このアッセイでは2つの区別可能なプロテアーゼ活性を検出することにより細胞生存性と細部毒性を同時に測定します。生細胞由来プロテアーゼ活性は、インタクトな生存細胞内に限定され、細胞透過性のペプチド基質(GF-AFC Substrate)を利用した蛍光法により測定されます。この基質は生存細胞に透過し、プロテアーゼに切断されて生細胞の数に比例した蛍光シグナルを生じます。この生細胞由来プロテーアーゼ活性マーカーは細胞膜の完全性が失われると不活性化して培地中に漏出します。2つめの細胞非透過性蛍光ペプチド(bis-AAF-R110 Substrate)は細胞膜の完全性を失った細胞から放出される死細胞由来プロテアーゼ活性の測定に使用されます。
- 同じウェル内で生細胞と死細胞を同時に測定："添加-混和-測定"だけのホモジニアスアッセイなので複数のプレートを並行して処理する必要が無く、細胞培養のコストを低減。
- 内部標準によるデータ補正：生細胞数と死細胞数の比率は、細胞数に依存しない補正されたデータであるため、ウェル間、プレート間、測定日間での比較が容易。
- 擬陽性/擬陰性を低減：互いに異なる化学反応を利用しているため、生細胞および死細胞の測定は互いに補完的に機能（片方がテスト化合物に阻害されても、もう片方が内部標準となる）。
- 各ウェルからより多くのデータを取得：多くの生物発光セルベースアッセイ（アポトーシスアッセイ、レポーターアッセイ）とのマルチアッセイが可能。
- アッセイのバラツキを低減：ホモジニアスな"添加-混和-測定"によるシンプルなプロトコルは、ステップ数の多いプロトコルによるエラーの蓄積を回避。
- 同じウェルで細胞生存性試験と細胞毒性試験
- プロメガの発光セルベースアッセイとのマルチアッセイ
【パフォーマンス】製品概説 細胞生存性、細胞毒性のマルチアッセイの意義
【アプリケーション】細胞生存性試験、カスパーゼアッセイおよびレポーターアッセイを組み合わせたマルチアッセイ
【インフォメーション】細胞生存性、細胞毒性検出のための新しいバイオマーカー
サイズ10mlは96ウェルプレートフォーマットで1ウェルあたり試薬を100μl使用した場合100ウェル分に相当。384ウェルフォーマットの場合は1ウェルあたり使用量が1/4になるため4倍のアッセイが行えます。