MultiTox-Glo Multiplex Cytotoxicity Assayは連続した試薬の添加により細胞集団の中の相対的な生細胞数と死細胞数を蛍光と発光により測定します。MultiTox-Glo Assayでは細胞生存性または細胞毒性に対するマーカーである2種類のプロテアーゼ活性を測定します。生細胞用のプロテアーゼ活性はインタクトな生細胞にのみ存在し、細胞透過性の蛍光ペプチド基質(GF-AFC)を用いて測定されます。この基質はインタクトな細胞に入ると生細胞由来のプロテアーゼ活性により切断されてAFCが遊離し、生細胞数に比例した蛍光シグナルが生じます。生細胞由来プロテアーゼは、細胞膜の完全性が失われ培地中に漏出すると不活性します。2つめの細胞非透過性発光ペプチド基質(AAF-aminoluciferin)は細胞膜の完全性が失われると細胞から漏出する死細胞由来のプロテアーゼ活性の測定に使用されます。遊離したアミノルシフェリンは、アッセイ試薬に含まれるUltra-Glo™ 組換えルシフェラーゼにより生じるグロータイプの発光をして測定されます。
MultiTox-Glo Assayでは細胞生存性と細胞毒性のレシオメトリックまたは逆相関する値が得られ、確立された細胞生存性および細胞毒性測定法と相関します。生存細胞と死細胞の比率は細胞数とは独立した値なので補足データとして使用することができます。細胞生存性と細胞毒性がそれぞれ補完することで、テスト化合物や培地成分による化学的な干渉エラーを見つけるための内部標準として機能するだけでなく、ピペッティングや細胞凝集などによるエラーも低減させることができます。
- 培養中の生細胞と死細胞を同時に測定：ホモジニアスな”添加-混和-測定”プロトコルによる連続試薬添加アッセイ。
- ビルトインな内部標準により補正されたデータ：生細胞と死細胞の数の比率は細胞数とは独立しており補正データとして使用することが可能。この補正によりウエル間、プレート間、日にち間でより比較が容易に。
- 偽陽性および偽陰性をより迅速に同定：独立した細胞生存性と細胞毒性試験は互いにコントロールとして機能。もしテスト化合物が片方の測定反応に干渉した場合、もう片方が内部標準として機能。
- データの改善：偽陽性（または偽陰性）の統計的確率を低下させ、発光測定なので蛍光干渉の問題も排除。
【パフォーマンス】 細胞生存性、細胞毒性のマルチアッセイの意義
【アプリケーション】細胞生存性試験、カスパーゼアッセイおよびレポーターアッセイを組み合わせたマルチアッセイ
【インフォメーション】細胞生存性、細胞毒性検出のための新しいバイオマーカー
10mlサイズは96ウェルプレートで100ウェル分（100μl/ウェル使用）、384ウェルプレートで400ウェル分（25μl/ウェル使用）に相当。