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洗浄不要のIFN-βイムノアッセイ

  • 迅速な「添加して測定」プロトコルの細胞ベースアッセイ
  • ニーズに応じて拡張・調整可能な柔軟なアッセイフォーマット
  • 任意のマイクロプレートルミノメーターで測定可能な発光検出
  • 96ウェルまたは384ウェルプレートに対応(プロトコル付属)
  • パックサイズごとに96ウェルプレートでのアッセイ回数を明記

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概要
プロトコル
仕様
資料
関連製品

洗浄ステップなしでIFN-βの放出量を定量化

IFN-β(インターフェロンβ)は、自然免疫応答における重要なメディエーターであり、強力な抗ウイルス作用を持つとともに、さまざまな免疫細胞の活性を調節し、抗炎症作用も示します。また、多発性硬化症などの炎症性疾患に対する治療薬としても広く使用されています。

The Lumit® IFN-β Immunoassayは、細胞培養サンプル中に放出されたIFN-βを、洗浄不要のシンプルなプロトコルで定量的に測定する発光イムノアッセイです。標識済み抗体をサンプルに加え、さらに検出試薬を加えて混合し、標準的なプレートリーダーで発光シグナルを測定するだけで、解析が完了します。全プロトコルは70分以内に完了し、培養中の細胞に直接アッセイを行うことも、培養上清を別のプレートに移して測定することも可能です。

注:キットあたりのアッセイ実施数は、使用するウェルの最終反応容量により変動します。

標準的な反応容量における目安は以下のとおりです:

  • 100回用キット:96ウェルプレートで約100アッセイ、384ウェルプレートで約400アッセイに対応
  • 500回用キット:96ウェルプレートで約500アッセイ、384ウェルプレートで約2,000アッセイに対応
  • 1,000回用キット:96ウェルプレートで約1,000アッセイ、384ウェルプレートで約4,000アッセイに対応

Lumit® IFN-β Immunoassayの原理

IFN-β を高い特異性と感度で検出できる一次抗体を選定し、NanoBiT®ルシフェラーゼのサブユニットである LgBiT および SmBiT で標識しました。IFN-β が存在すると、これらのサブユニットが近接して活性型ルシフェラーゼ酵素が再構成されます。さらに、最適化された基質を加えることで、IFN-β の量に比例した明るい発光シグナルが得られます。

Schematic of Lumit™ IL-8 Immunoassay concept showing LgBiT and SmBiT binding protein binding to IL-8 and forming NanoBiT® Luciferase.

シンプルなワンプレートプロトコル、洗浄ステップなし!

Lumit™ IL-8 (Human) Immunoassay workflow.

Lumit® IFN-β 検出における広いリニアレンジ

Lumit® IFN-β Immunoassayは、ピコモルからナノモル濃度にわたる広いリニアレンジを持ち、多くの細胞モデルで想定されるIFN-β濃度を十分にカバーします。

Graph showing standard curve for Lumit® IFN-β (Human) Immunoassay.

製品名

Lumit® IFN-β (Human) Immunoassay

ダイナミックレンジ

18.2–25,000pg/ml

検出下限(LOD)

6.9pg/ml(バックグラウンドの3標準偏差上)

最小検出可能量 (MDD)

4.6pg/ml(バックグラウンドの2標準偏差上)

アッセイ時間

70 分

サンプルタイプ

細胞培養上清

SD=Standard Deviation

 

他のターゲットも測定したいですか?

まだまだラインアップ拡大中
Lumit® Immunoassays

時間の価値を深く理解しているバイオテック企業にとって、Lumit® Immunoassaysは、信頼性の高いデータを迅速に取得し、より早く結論を導き意思決定を行うために不可欠なツールです。

Corner Therapeutics プリンシパルサイエンティスト Jonathan Chow 氏

特別ウェビナー

Lumit® IL-6 Immunoassayを用いたハイスループット創薬スクリーニングの最適化

本ウェビナーでは、Lumit® Immunoassayを96ウェルプレートから多数の384ウェルプレートへとスケールアップする際の重要な検討事項を共有し、ハイスループットスクリーニング(HTS)用途における最適化のための実践的なヒントをご紹介します。また、Galapagos社の研究者 Dr. Nick Verstraeten 氏による使用事例も取り上げ、同氏のチームがLumit® IL-6 Immunoassayを活用して、抗ウイルス薬のスクリーニングキャンペーンをどのように展開したかをご紹介します。

オンデマンドウェビナーを見る

免疫細胞からのIFN-β放出をLumit®で検出

Line graph showing Lumit® detection of IFN-β release from immune cells.

 

THP-1細胞を96ウェルプレートに1ウェルあたり50,000 個ずつ播種し、RPMI 1640培地+10%熱不活性化FBSで培養した。細胞は2′3′-cGAMPを濃度漸増させて三重複で40時間処理し、一部のサンプルには処理の最後20時間に1 μg/mlのLPSを添加した。処理後、IFN-βの放出量をLumit® IFN-β Immunoassayを用いて定量した。

Specifications

Catalog Number:

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 1 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 1 × 3.2ml

Anti-hIFN-β mAb-SmBiT, 1000X

W180A 1 × 15μl

Anti-hIFN-β mAb-LgBiT, 1000X

W181A 1 × 15μl

Human IFN-β Standard

W149A 1 × 25μl

分析証明書

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405B 1 × 1.25ml

Lumit® Detection Buffer B

VB406B 1 × 25ml

Anti-hIFN-β mAb-SmBiT, 1000X

W180B 1 × 150μl

Anti-hIFN-β mAb-LgBiT, 1000X

W181B 1 × 150μl

Human IFN-β Standard

W149A 1 × 25μl

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For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 5 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 5 × 3.2ml

Anti-hIFN-β mAb-SmBiT, 1000X

W180A 5 × 15μl

Anti-hIFN-β mAb-LgBiT, 1000X

W181A 5 × 15μl

Human IFN-β Standard

W149A 1 × 25μl

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For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Human IFN-β Standard

W149A 1 × 25μl

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