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洗浄不要の IL-17Aイムノアッセイ

  • 細胞上で直接実施可能な迅速な「添加して測定」プロトコル
  • 任意のマイクロプレートルミノメーターで測定可能な発光検出
  • 96ウェルまたは384ウェルプレートに対応(プロトコル付属)
  • パックサイズごとに96ウェルプレートでのアッセイ回数を明記

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概要
プロトコル
仕様
資料
関連製品

洗浄ステップなしでIL-17Aの放出量を定量化

IL-17A は炎症性サイトカインの一種で、病原体に対する生体防御機構を仲介するとともに、さまざまな炎症性疾患や自己免疫疾患の病態形成に関与する重要な因子です。IL-17A を標的とする治療アプローチは、炎症の軽減と自己免疫疾患における臨床的改善につながることが報告されています。

The Lumit® IL-17A Immunoassayは、細胞培養サンプル中に放出された IL-17A を、洗浄不要でシンプルなプロトコルにより定量的に測定できる発光イムノアッセイです。標識済み抗体をサンプルに添加し、検出試薬を加えて混合するだけで、標準的なプレートリーダーを用いて発光シグナルを測定できます。全プロトコルは70分以内に完了し、培養中の細胞に直接アッセイを行うことも、培養上清を別プレートに移して測定することも可能です。

注:キットあたりのアッセイ実施数は、使用するウェルの最終反応容量により変動します。 

標準的な反応容量における目安:

  • 100回用キット:96ウェルプレートで約100アッセイ、384ウェルプレートで約400アッセイに対応 
  • 500回用キット:96ウェルプレートで約500アッセイ、384ウェルプレートで約2,000アッセイに対応
  • 1,000回用キット:96ウェルプレートで約1,000アッセイ、384ウェルプレートで約4,000アッセイに対応

Lumit® IL-17A Immunoassay の原理

IL-17Aを高い特異性と感度で検出するために選定された一次抗体は、NanoBiT®ルシフェラーゼのサブユニットであるLgBiTおよびSmBiTで標識されています。IL-17Aが存在することで、これらのサブユニットが近接し、活性型のルシフェラーゼ酵素が再構成されます。最適化された基質を加えることで、IL-17Aの濃度に比例した明るい発光シグナルが得られます。このアッセイはIL-17Aに対して高い特異性を示し、IL-17B、D、E、Fなどの他のファミリーメンバーは検出しません。

Schematic of Lumit™ IL-17A Immunoassay concept showing LgBiT and SmBiT binding protein binding to IL-17 and forming NanoBiT® Luciferase.

シンプルなワンプレートプロトコル、洗浄ステップなし!

Lumit™ IL-17A (Human) Immunoassay workflow.

Lumit® IL-17A検出における広いリニアレンジ

Lumit® IL-17A Immunoassayは、ピコモルからナノモル濃度にわたる広いリニアレンジを持ち、多くの細胞モデルで想定されるIL-17A濃度を十分にカバーします。

Graph showing standard curve for Lumit® IL-17A (Human) Immunoassay.

製品名

Lumit® IL-17A Immunoassay

ダイナミックレンジ

18.2–25,000pg/ml

検出下限(LOD)

2.2pg/ml(バックグラウンドの3標準偏差上)

最小検出可能量 (MDD)

1.3pg/ml (バックグラウンドの2標準偏差上)

アッセイ時間

70 分

サンプル

細胞培養上清

SD=Standard Deviation

 

他のターゲットも測定したいですか?

まだまだラインアップ拡大中
Lumit® Immunoassays.

時間の価値を深く理解しているバイオテック企業にとって、Lumit® Immunoassaysは、信頼性の高いデータを迅速に取得し、より早く結論を導き意思決定を行うために不可欠なツールです。

Corner Therapeutics プリンシパルサイエンティスト Jonathan Chow 氏

特別ウェビナー

Lumit® IL-6 Immunoassayを用いたハイスループット創薬スクリーニングの最適化

本ウェビナーでは、Lumit® Immunoassayを96ウェルプレートから多数の384ウェルプレートへとスケールアップする際の重要な検討事項を共有し、ハイスループットスクリーニング(HTS)用途における最適化のための実践的なヒントをご紹介します。また、Galapagos社の研究者 Dr. Nick Verstraeten 氏による使用事例も取り上げ、同氏のチームがLumit® IL-6 Immunoassayを活用して、抗ウイルス薬のスクリーニングキャンペーンをどのように展開したかをご紹介します。

オンデマンドウェビナーを見る

PBMC由来のIL-17A放出をLumit®で検出

Line graph showing Lumit® detection of IL-17A release from PBMC.

 

末梢血単核球(PBMC)を96ウェルプレートに1ウェルあたり100,000個で播種し、RPMI 1640培地+10%熱不活性化FBSで培養した。細胞には、PMAとイオノマイシンを含む細胞刺激カクテルを濃度漸増させて添加し、4点繰り返しで48時間処理した。処理後、IL-17Aの放出量をLumit® IL-17A IL-17A Immunoassayを用いて定量した。

仕様

Catalog Number:

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 1 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 1 × 3.2ml

Anti-hIL-17A mAb-SmBiT, 500X

W144A 1 × 30μl

Anti-hIL-17A mAb-LgBiT, 500X

W145A 1 × 30μl

Human IL-17A Standard

W143A 1 × 25μl

分析証明書

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405B 1 × 1.25ml

Lumit® Detection Buffer B

VB406B 1 × 25ml

Anti-hIL-17A mAb-SmBiT, 500X

W144B 1 × 300μl

Anti-hIL-17A mAb-LgBiT, 500X

W145B 1 × 300μl

Human IL-17A Standard

W143A 1 × 25μl

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U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

VB405A 5 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

VB406A 5 × 3.2ml

Anti-hIL-17A mAb-SmBiT, 500X

W144A 5 × 30μl

Anti-hIL-17A mAb-LgBiT, 500X

W145A 5 × 30μl

Human IL-17A Standard

W143A 1 × 25μl

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

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Human IL-17A Standard

W143A 1 × 25μl

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