Lumit® Second Messenger Assays
高感度、シンプル、ホモジニアスなcAMP・cGMP・cGAMP定量アッセイ
- 洗浄不要のホモジニアスフォーマット：試薬を加えて測定するだけのプロトコールで、ワークフローを簡略化し、操作回数を最小化
- 優れた感度と特異性：低レベルの環状ヌクレオチドも検出可能で、交差反応は最小限
- 柔軟かつスケーラブルな運用：96ウェルおよび384ウェルプレートに対応し、多様なスクリーニングに適応
- 高速かつ信頼性の高い結果：数分以内に発光シグナルを測定可能
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Catalog Number: CS3592A05
Catalog Number: CS3592A08
Catalog Number: CS3592A13
概要
Lumit® Second Messenger Assayは、細胞ライセートからcAMP、cGMP、またはcGAMPといった細胞内環状ヌクレオチドを直接定量するのに最適な、洗浄不要で高感度な発光型競合法アッセイです。これらのアッセイは、NanoLuc®ルシフェラーゼの構造補完技術に基づいたプロメガの革新的なLumit®テクノロジーを活用しており、シンプルなワークフローと高い感度を両立しています。これにより、ハイスループットスクリーニングや創薬研究への応用に最適な検出系を提供します。
アッセイワークフロー
Lumit®環状ヌクレオチドアッセイには、SmBiTで標識された環状ヌクレオチド（トレーサー）、一次抗体としてのマウス抗環状ヌクレオチドモノクローナル抗体、およびLgBiTと結合した抗マウス二次抗体が含まれています。未標識の環状ヌクレオチドが存在しない場合、トレーサーはこれらの抗体と結合して複合体を形成し、SmBiTとLgBiTが近接することでNanoLuc®ルシフェラーゼが再構成されます。この状態でLumit® Detection Substrateを添加すると、強い発光シグナルが生成されます。一方、未標識の環状ヌクレオチドが存在し、濃度が上昇すると、トレーサーと抗体との結合を競合し、複合体の形成が阻害されるため、SmBiTとLgBiTの再構成が起こりにくくなります。その結果、発光シグナルは減少し、シグナルの強度は未標識のcAMP濃度に比例して低下します。
文献紹介
査読済み論文において、Lumit® Second Messenger Assayが、複数の細胞種や生化学反応系におけるcAMP、cGAMP、cGMPのモニタリングに使用されていることが示されています。
Lumit® cAMP Assay
Mikheil, D. et al. A bioluminescent and homogeneous assay for monitoring GPCR-mediated cAMP modulation and PDE activity. Sci. Rep. 14(1):4440.
Lumit® cGAMP Assay
Hsiao, K., et al. Homogeneous and bioluminescent biochemical and cellular assay for monitoring cGAMP and enzymes that generate and degrade cGAMP. Sci. Rep. 14, 31165.
Lumit® cGMP Assay
Murray, N.H. et al. A homogeneous bioluminescent system to monitor cyclic guanosine monophosphate. ACS Pharmacol. Transl. Sci. 6(12):1851–1858.
プロトコル
No protocols available
製品仕様
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
2’, 3’- cGAMP Standard, 1mM |
CS3592A01 | 1 × 10μl |
Lumit® 2’, 3’-cGAMP-Tracer, 100X |
CS3592A02 | 1 × 35μl |
Anti-2’, 3’-cGAMP mAb, 100X |
CS3592A03 | 1 × 35μl |
Antibody Dilution Solution, 2X |
CS3592A04 | 2 × 1.0ml |
|
Digitonin |
G944B | 1 × 175μl |
Lumit® Detection Substrate C |
VB103A | 2 × 200μl |
Lumit® Immunoassay Buffer C, 10X |
VB115A | 1 × 1.5ml |
Lumit® Anti-Mouse Ab-LgBiT |
W102A | 1 × 30μl |
U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
Anti-cAMP antibody (mouse) |
CS3592A06 | 1 × 30μl |
cAMP Tracer |
CS3592A07 | 1 × 16μl |
|
Digitonin |
G944B | 1 × 175μl |
|
cAMP, 1mM |
V642B | 1 × 100μl |
Lumit® Detection Substrate C |
VB103A | 2 × 200μl |
Lumit® Immunoassay Buffer C, 10X |
VB115A | 1 × 1.5ml |
Lumit® Anti-Mouse Ab-LgBiT |
W102A | 2 × 30μl |
U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
cGMP Standard, 1mM |
CS3592A09 | 1 × 10μl |
2x Neutralization Buffer |
CS3592A10 | 2 × 750μl |
cGMP-SmBiT Tracer |
CS3592A11 | 1 × 25μl |
Anti-cGMP mAb |
CS3592A12 | 1 × 25μl |
|
Digitonin |
G944B | 1 × 175μl |
Lumit® Detection Substrate C |
VB103A | 2 × 200μl |
Lumit® Immunoassay Buffer C, 10X |
VB115A | 2 × 1.5ml |
Lumit® Anti-Rabbit Ab-LgBiT |
W104A | 2 × 30μl |
U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.
