RAS-RAF経路アッセイ

RAS-RAF-MAPK経路は、細胞の増殖、生存、および分化の制御において中心的な役割を果たしています。さまざまながんでは、この経路に異常が見られることがあり、がん治療薬の重要な標的となっています。BRAF、MEK、ERKなど、RAS-RAF経路を構成する因子を阻害する薬剤は、特定の遺伝的変異を有する悪性腫瘍に対して有効性を示しており、すでに治療に使用されています。近年では、かつて「創薬不可能（undruggable）」とされていた KRAS に対しても、KRAS（G12C）阻害剤の発見により創薬ターゲットとしての可能性が示されました。現在では、KRAS の他のホットスポット変異に対する薬剤も開発が進められています。しかし、これらの初期薬剤の有効性は、薬剤耐性の出現によって制限される可能性があります。そのため、RAS-RAF 経路の分子メカニズムをより深く理解し、新たな治療戦略を見出すためのさらなる研究が必要です。

RAS-RAF経路を評価するための手法には、さまざまな種類があります。NanoBRET® Target Engagement Assay を用いることで、RAS-RAF経路内の標的に対する化合物の結合を、生細胞内で直接定量することができます。RAS-RAF経路の構成因子は、経路の活性化に伴ってタンパク質複合体を形成することが多くあります。タンパク質間相互作用アッセイでは、生細胞または精製タンパク質を用いて、これらの複合体形成に対する化合物の影響を測定することができます。この経路のシグナル伝達は主にキナーゼによって制御されるため、ADP-Glo™ Kinase Assayなどのキナーゼ活性アッセイを用いて、精製キナーゼを対象とした化合物のスクリーニングや特性評価が可能です。細胞内でのキナーゼ活性は、Lumit™ Immunoassay Cellular Systemsなどの免疫アッセイを使用して、基質のリン酸化を検出することで評価できます。