ADP-Glo™ Max Assay
Luminescent Method to Measure ATPase or Kinase Activity
- Screen library compounds for effects on target enzymes
- Perform mode of action studies on enzymes of interest
- Measure activity of immunoprecipitated ATPases/kinases
- Use when higher ATP concentration is required (up to 5mM)
Catalog Number:
Size
Catalog Number: V7001
Catalog Number: V7002
アッセイは2段階のステップにより行われます。まず、キナーゼ反応後に等量のADP-Glo™ Reagentを加えキナーゼ反応を停止させ、残存するATPを枯渇させます。次に、the ADP-Glo™ Max Detection Reagentを添加し、ADPからATPへの変換とルシフェラーゼ/ルシフェリンによるカップリング反応が同時に行われます。
ADP-Glo™ Max Assayは広いダイナミックレンジを有し、低いATP/ADP変換率でも高いシグナルを生成するため、薬剤細胞膜トランスポーターやヒートショックプロテインなど活性の低いATPaseのスクリーニングに最適です。このアッセイでは擬陽性も低く、Z'値は0.7以上を示します。
ADP-Glo Kinase Assayに最適な酵素と基質がセットになったKinase Enzyme Systemも発売されました。
- ATP変換が低くても高いシグナル強度:研究者はより生体内に近い条件でキナーゼ活性を測定可能（低活性のATPase/キナーゼに最適）。
- 選択性:低濃度のADPでも感度良く測定できるので、他のアッセイに比べて少量の酵素で測定できるので経済的。
- ユニバーサル:1つのプラットフォームで広範な酵素のスクリーニングが可能（実質的にADPを生成するあらゆる酵素に適応可能）。
- 広いATPレベルに適応:ATP濃度最大5mMまで使用可能（ATPに対して高いKm値を持つ酵素や作用機序の実験に重要）。
- 高精度:広範な初期ATP濃度で正確にADPレベルを測定でき、放射性ベースのアッセイに比べて 測定した活性が真の酵素活性を反映し、正確なIC50が得られていることを実感できます。
- 標的酵素への影響を見るための化合物ライブラリーのスクリーニング
- 目的酵素の作用機序研究での使用
- 免疫沈降したATPaseやキナーゼの活性測定
ADP-Glo™ Applications Database.も併せてご覧ください。
【Q&A】ADP-Glo.
表示の回数は384ウェルプフォーマットの場合
Principle of the ADP-Glo™ Max Assay. The assay is performed in two steps: 1) after the ATPase or kinase reaction, ADP-Glo™ Reagent is added to terminate the reaction and deplete the remaining ATP; and 2) the ADP-Glo™ Max Detection Reagent is added to convert ADP to ATP and allow the newly synthesized ATP to be measured using a luciferase/luciferin reaction. The light generated correlates to ADP present and ATPase activity.
Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
ADP-Glo™ Max Detection Buffer |
V701A | 1 × 10ml |
ADP-Glo™ Max Detection Substrate |
V702A | 1 × 1 vial |
|
Ultra Pure ATP, 100mM |
V703A | 1 × 250μl |
|
ADP-Glo™ Reagent |
V912A | 1 × 5ml |
|
ADP, 10mM |
V916A | 2 × 500μl |
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
U.S. Pat. No. 8,183,007 and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
ADP-Glo™ Max Detection Buffer |
V701B | 1 × 100ml |
ADP-Glo™ Max Detection Substrate |
V702B | 1 × 1 vial |
|
Ultra Pure ATP, 100mM |
V703B | 1 × 2.5ml |
|
ADP-Glo™ Reagent |
V912B | 1 × 50ml |
|
ADP, 10mM |
V916B | 1 × 5ml |
U.S. Pat. No. 7,700,310 and other patents and patents pending.
U.S. Pat. No. 8,183,007 and other patents and patents pending.
Resources
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