C8640_Flexi-Cloning-System C8820_Flexi--System--Transfer_3 C9320_Carboxy-Flexi--System--Transfer_3

Directional Cloning of Protein-Coding Sequences

  • Choose from a variety of initial applications (e.g., bacterial protein, mammalian or cell-free protein expression) and then transfer the insert as required
  • Efficient insert transfer means direct use of recombinant clones with minimal time for screening background colonies
  • Adaptable to high-throughput formats for large screening projects

Catalog Number:

Choose a kit

Size

Catalog Number: C8640

Please Enquire

Catalog Number: C8820

Please Enquire

Catalog Number: C9320

Please Enquire


Overview
Protocols
Specifications
Resources
Related Products
  Flexi Cloning Systemは、2つのレアカッター制限酵素SgfIおよびPmeIを利用したシンプルで強力なディレクショナルクローニングシステムです。これらのシステムにより、様々なFlexi®Vector間におけるタンパク質コード配列を迅速で効率よく正確に移し換えることができます。全てのFlexi®Vectorには致死性のバーナーゼ遺伝子が組み込まれており、目的とするDNA断片との置換によりポジティブセレクションが行えます。一度 Flexi®Vectorにクローニングされれば、他の機能を有するFlexi®Vectorにサブクローニングする際もSgfIおよびPmeIで切り出すことにより方向性、読み枠を維持したまま移すことができ、確認のために再度シークエンシングを行う必要がなくハイスループットフォーマットにも対応します。部位特異的な組換えベクターシステムとは異なり、目的タンパク質のN,C末端に複数の余分なアミノ酸を付加する必要が無く(C末端のValのみ)、保存用のエントリーベクターも不要で、通常、実験に適したFlexi®Vectorに直接組み込むことができます。
C-terminal Flexi®Vector(pFCで始まるベクター)はC末端にタグを持つタンパク質を発現します。両端にSgfIおよびPmeIを持つタンパク質コード領域をSgfIおよびEcoICRIで切断したこれらのベクターに組換えることができます(ただし、C-terminal Flexi®Vectorにクローニングしたインサートは他のFlexi®ベクターへの移換えは不能)。 

HaloTag® Flexi® Vectorsの詳細は、  HaloTag® Technologyページ をご覧ください。


  • 柔軟性:様々な発現ベクターに直接クローニングでき、他種発現ベクターへの移し換えもダイレクト
  • シンプル:制限酵素サイトを付加するだけなので、プライマーも短く設計でき、N,C末端に付加されるアミノ酸が最少限
  • 時間、コストの節約:エントリーベクターが不要なため、組換えクローンをそのまま発現実験に使用でき、煩雑な確認作業を簡略化
  • 生産性の向上:シンプルなクローニング法によりスクリーニングプロジェクトなどハイスループットフォーマットに対応
  • 使用制限なし:ライセンス料や面倒な譲渡制限もありません
  • 様々な発現ベクター:細胞内でのタンパク質動態イメージングを可能にするHaloTag®など様々な発現ベクターを用意
  • ORFクローンコレクション:現在、Flexi®フォーマットで約3,000クローンを利用可能

  • ORFのクローニングおよび他種発現ベクターへの簡便な移し変え

さらに知りたい方は、プロトコール&ガイド(英語)をご覧ください。

Note: 多様な哺乳類発現ベクターとカスタムクローニングオプションでHaloTagテクノロジーを用いた20,000種のヒトORFクローン、15,000マウスORFクローンがあります。

詳細は、 www.kazusa.or.jp/kop/dsearch/ をご覧ください。


【ライセンス】HaloTagシリーズ

【Flexi®Vector の機能別リストについて】日本語   【パフォーマンス】タンパク質コード領域のクロー二ングおよび発現のための 新しいシステム

【Q&A】Flexi® Vector

Cloning a protein-coding region into the Flexi® Vectors.

4599ma

Transfer of a protein-coding region between N-terminal or native Flexi® Vectors.

4600ma

For more information about the HaloTag® Flexi® Vectors, please visit the HaloTag® Technology page.

Note: For access to 20,000 human and 15,000 mouse ORF clones with HaloTag® Technology in multiple mammalian expression vectors and custom cloning options, visit: www.genecopoeia.com and www.kasuza.or.jp.kop/dsearch-e

Specifications

Catalog Number:

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

Flexi® Enzyme Blend (SgfI & PmeI)

R188A 2 × 50μl View Product

T4 DNA Ligase (HC)

M179A 1 × 500u

5X Flexi® Digest Buffer

R186A 1 × 1ml

2X Flexi® Ligase Buffer

R187A 1 × 500μl

Nuclease-Free Water

P119A 2 × 1,250μl View Product

Wizard® SV Minicolumns

A129C 1 × 10/pk

Collection Tubes

A130C 1 × 10/pk

Vacuum Adapter

A133C 1 × 5/pk View Product

Membrane Wash Solution

A929A 1 × 3ml

Membrane Binding Solution

A930A 1 × 4ml View Product

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

See Protocol for storage recommendations.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

T4 DNA Ligase (HC)

M179A 4 × 500u

Nuclease-Free Water

P119A 2 × 1,250μl View Product

5X Flexi® Digest Buffer

R186A 1 × 1ml

2X Flexi® Ligase Buffer

R187A 2 × 500μl

Flexi® Enzyme Blend (SgfI & PmeI)

R188A 4 × 50μl View Product

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

BB

See Protocol for storage recommendations.

パテントおよび免責条項

For research use only. Persons wishing to use this product or its derivatives in other fields of use, including without limitation, commercial sale, diagnostics or therapeutics, should contact Promega Corporation for licensing information.

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

T4 DNA Ligase (HC)

M179A 2 × 500u

Nuclease-Free Water

P119A 1 × 1,250μl View Product

5X Flexi® Digest Buffer

R186A 1 × 1ml

2X Flexi® Ligase Buffer

R187A 1 × 500μl

Flexi® Enzyme Blend (SgfI & PmeI)

R188A 1 × 50μl View Product

Carboxy Flexi® Enzyme Blend (SgfI & EcoICRI)

R190A 1 × 50μl View Product

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

BB

See Protocol for storage recommendations.

パテントおよび免責条項

For research use only. Persons wishing to use this product or its derivatives in other fields of use, including without limitation, commercial sale, diagnostics or therapeutics, should contact Promega Corporation for licensing information.

関連製品