Flexi®Vector Systemは、タンパク質コード配列を簡便、パワフルに方向性を維持してクローニング（ダイレクショナルクローニング）する方法を提供します。このクローニング法は２種類のレアカッター制限酵素SgfIおよびPmeIがベースとなっており、様々なFlexi®ベクター間でタンパク質コード領域を移し換える迅速、効率的、フィデリティーの高い方法で、シークエンシングをする必要もありません。
以下のベクターは特定の系で最大の無細胞タンパク質発現のための特殊な配列を付加してデザインしたベクターです。pF3A/K WGベクターは小麦胚芽抽出液とともに使用するためにデザインされており。目的とするタンパク質コード領域の上流および下流にRNA植物ウイルスであるオオムギ黄萎ウイルス(BYDV)由来の配列を含みます。BYDVエレメントは互いに相互作用して閉ループが形成され、mRNAキャッピングおよびポリアデニル化に対する依存性を回避した相乗的な翻訳が促進されます。pF25A/K ICE Vectorsは昆虫細胞抽出液で使用するためにデザインされており、翻訳効率を向上させるためにコード領域の5´および3´末端に非翻訳領域(UTR)配列が含まれます。
注: Flexi®ベクターには致死性のバーナーゼ遺伝子が含まれているため、サブクローニングを行う上でインサートを含まないバックグラウンドコロニーを低減することができます。Flexi®Vector Cloning Systemではバーナーゼを目的のインサートで置き換えます。インサートとの交換前のバーナーゼを含むベクターは、標準的な実験室の大腸菌株では増やせません。
- 多用途: 植物、昆虫の発現系にも対応するFlexi®システム
- 時間の節約: 効率の高い移換え法により、バックグラウンドコロニーを排除する手間もなく、そのまま組換えクローンを使用可能
- 生産性の向上: スクリーニングプロジェクトなどハイスループットフォーマットにも対応
- ランセンスなし: ライセンスフィーや複雑な譲渡制限なし
- 様々な種類のベクターから用途にマッチしたベクターへのORFクローニングおよびインサートの移換え
さらに知りたい方は、プロトコール&ガイド（英語）をご覧ください。
20,000以上のヒトORFを揃えるFlexi®ベクターベースのFlexi®クローンについてはこちらをご覧ください。
【ベクターマップ＆シークエンス】
日本語
【パフォーマンス】タンパク質コード領域のクロー二ングおよび発現のための 新しいシステム
【Q&A】Flexi® Vector Ｇ418
About the Flexi® Vector System
The Flexi® Vector System is a simple, yet powerful, directional cloning method for protein-coding sequences. It is based on two rare-cutting restriction enzymes, SgfI and PmeI, and provides a rapid, efficient and high-fidelity way to transfer protein-coding regions between a variety of Flexi® Vectors without the need to resequence. These in vitro translation Flexi® vectors are designed with special sequences for maximal cell-free protein expression in a specific extract system.
Note: Flexi® Vectors contain the lethal barnase gene to reduce background colonies without inserts during the subcloning procedure. Using the Flexi® Vector Cloning System replaces the barnase gene with your insert. These vectors, as purchased, cannot be cultured in normal laboratory strains of E. coli without an insert.
すぐに使用できる HaloTag® Flexi® ORF クローン
プロメガの Flexi® ORF Clone は ヒト ORF 20,000 クローン、マウス ORF 15,000 クローン を揃えたクローンコレクションで 、Flexi® HiBiT ベクターへも容易にORFを移換えることができます。詳細についてはORFこちらをご覧ください。