DNA Polymerase I

DNA Polymerase Iは、二本鎖DNAにおいてDNA鎖を5'→3'方向に合成します。多くのDNAポリメラーゼと同様に、3'→5'エキソヌクレアーゼ活性を示す“Proof Reader”です。また、5'→3'エキソヌクレアーゼ活性も示すため、伸長中のDNA鎖でヌクレオチドを置換する機能を持ちます。
また、組換え大腸菌から精製された本酵素はホモポリマーのde novo合成を触媒するので、特定のDNA基質の調製に利用することもできます。

• 10XReaction Buffer添付：500mM Tris-HCl (pH7.2 at 25°C）,100mM MgSO₄, 1mM DTT.
• 汎用：様々な分子生物学実験で使用
• 不活性化：68°C,10分間で不活性化

• ニックトランスレーションによる比活性の高い放射性標識が可能
• セカンドストランドcDNAの合成
• DNA分子の3'-突出末端の標識反応

1. Kelly, R.B. et al. (1970) J. Biol. Chem. 245, 39–45.
2. Harwood, S.J. et al. (1970) J. Biol. Chem. 245, 5614–24.

Storage Buffer: 50mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25°C), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% (v/v) glycerol.

Source: Recombinant E. coli strain.

QC Tests: Activity, SDS-PAGE/purity, endonuclease.

Unit Definition: One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 10nmol of deoxyribonucleotides into TCA-insoluble material in 30 minutes at 37°C. The reaction conditions are: 67mM potassium phosphate (pH 7.4 at 25°C), 6.7mM MgCl₂, 1mM DTT, 50μg/ml activated calf thymus DNA and 33μM dATP, dCTP, dGTP and dTTP (a mix of unlabeled and [³H]dTTP).