Triglyceride-Glo™ Assay

3T3L1-MBX 線維芽細胞から分化した脂肪細胞を、有機抽出法の有無と Triglyceride-Glo™ アッセイの組み合わせで測定しました。1セットのウェル分をメタノールで抽出し、ガラスバイアルに移して一晩蒸発させて乾固させました。

他のウェルセットでは有機抽出は行わず、両方のサンプルセットを Lysis Solution で抽出し、トリグリセリドレベルを測定しました。有機抽出を行わずに回収したトリグリセリド量が6回の繰り返し実験でいずれも多く、変動も少なかった。

肝細胞のトリグリセリドレベルの定量化は、非アルコール性脂肪性肝疾患（NAFLD）や非アルコール性脂肪性肝炎（NASH）など肝疾患研究に使用されます。ここでは、ヒト肝臓 微小組織を肝細胞の脂肪変性モデルとして使用し、トリグリセリドレベルを定量化します。

3D InSight™ヒト肝臓 微小組織（MT、InSphero、〜1150個 細胞/ウェル）を生理学的（LG / LI）または超生理学的（LG / HI）レベルのグルコースおよびインスリンを含む無血清培地で3〜10日間インキュベートし、 BSAに結合した遊離脂肪酸（FFA）または低密度リポタンパク質血漿画分（LDL）のいずれかを補充しました。細胞内グリセロール含量は総グリセロール含量に有意に寄与しないため、微小組織をPBSで2回洗浄し、標準プロトコルに従って総グリセロール含量を測定しました。値は、MTあたりのトリグリセリドの濃度としてプロットされました。データは、スイスのチューリッヒにあるInSphero、AGから提供されました。