Glucose-Glo™ Assay
Detect Even Small Changes in Glucose
- Measure glucose in a variety of sample types
- No sample deproteinization required
- Limit of glucose detection down to nM range
- Glucose assay signal to background >1,000
Catalog Number:
Size
Catalog Number: J6021
Catalog Number: J6022
生物学的サンプルより迅速、選択的、高感度にグルコースを検出
Glucose-Glo™ Assay は生物学的サンプルよりグルコースを迅速、選択的、高感度に検出する発光アッセイです。発光シグナルは発色法や蛍光法によるグルコースアッセイで起こるシグナルへの干渉がなく、サンプルの調製ステップで除タンパク質も必要ありません。Glucose-Glo™ Assay は解糖系あるいは糖新生におけるグルコース合成でおこるグルコースの消費量変化の検出に最適です。測定原理
The Glucose-Glo™ Assay はグルコースの酸化とそれにより生成される NADH を発光 NADH 検出システムで測定します。グルコース脱水素酵素がグルコースとNAD+を用いて NADHを産生します。この NADH 存在下でルシフェリン前駆体基質はレダクターゼによりルシフェリンに変換され Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase の基質となり発光します。
グルコース脱水素酵素 (GDH)、NAD+、レダクターゼ、レダクターゼ基質およびルシフェラーゼを含む Glucose Detection Reagent をグルコースを含むサンプルに等量加えると酵素カップリング反応が同時に起こります。発光シグナルはサンプルに含まれるグルコース量に比例し、すべてのグルコースが消費されるまで増加し、その後発光シグナルは安定します。
グルコース測定の検出感度と測定レンジ
処理数およびワークフローへ容易に対応
Glucose-Glo™ Assay は柔軟性の高いシステムで、ハイスループットフォーマット も可能で、細胞、ライセート、組織、血漿、血清など多くのサンプル種にも対応します。いくつかのサンプルではリニアレンジにフィットさせるために希釈などの前処理が必要な場合もあります。また、内在性の酵素活性の不活化、除タンパク質および NAD(P)H 分解などが必要な場合もありますが、これらの処理を簡便に行う96- および 384 ウェルプレートに対応した方法を提供しており、サンプルの遠心やスピンカラムも使用しません。
付着性 肺がん細胞 A549 細胞によるグルコースの消費
1つのサンプルより複数の代謝産物を測定 !
細胞内のエネルギー状態で重要な4種類の代謝産物 — グルコース、乳酸、グルタミン酸およびグルタミンを発光アッセイ Glucose-Glo™、Lactate-Glo™、 Glutamine/Glutamate-Glo™ および Glutamate-Glo™ Assay で同時並行で測定することができます。 これら4種の発光アッセイすべてにサンプル処理が対応するため4種すべての代謝物を同一サンプルより検出することができます。これらのサンプル種には培地、血漿、血清および組織などが含まれます。以下のデータは Technical Manual TM494 に従い、同じ培養細胞より取得した培地サンプルを用いて代謝産物を測定したものです。
利点
様々なサンプル種より迅速に代謝物を測定: 培地、細胞、組織および血漿より測定可能。最小限のサンプル調製ステップだけで、遠心やスピンカラムは不要。
広いダイナミックレンジ: 50µM までの広い直線性を示すためサンプル測定が容易
わずかな変化でも検出: S/Bmax > 1000 のアッセイウインドウを持つので発色法や蛍光法によるアッセイよりもわずかな代謝物レベルの変化を検出
サンプルあたりの情報量を最大限に: 同じサンプルより複数の代謝物を測定でき、細胞生存性試験とのマルチアッセイで補正することも可能
参考文献
- Zhou, W. et al. (2014) Self-immolative bioluminogenic quinone luciferins for NAD(P)H assays and reducing capacity-based cell viability assays. Chem BioChem 15, 670–5.
- Vidugiriene, J. et al. (2014) Bioluminescent cell-based NAD(P)/NAD(P)H assays for rapid dinucleotide measurement and inhibitor screening. Assay and Drug Development Technologies 12, 514–26.
- Leippe, D. et al. (2017) Bioluminescent assays for glucose and glutamine metabolism: High-throughput screening for changes in extracellular and intracellular metabolites. SLAS Discovery 22(4), 366–77.
FAQs
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Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
Reductase |
G884A | 1 × 55μl | 6mg/ml |
Reductase Substrate |
G885A | 1 × 55μl | |
Luciferin Detection Solution |
J135A | 1 × 5ml | |
NAD |
J136A | 1 × 30μl | |
Glucose |
J138A | 1 × 50μl | |
Glucose Dehydrogenase |
J140A | 1 × 200μl |
U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
Reductase |
G884B | 1 × 275μl | 6mg/ml |
Reductase Substrate |
G885B | 1 × 275μl | |
Luciferin Detection Solution |
J135B | 1 × 50ml | |
NAD |
J136B | 1 × 275μl | |
Glucose |
J138A | 1 × 50μl | |
Glucose Dehydrogenase |
J140B | 2 × 1ml |
U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.
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