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Glucose-Glo™ Assay

Part Numbers: J6021, J6022

J6021_Glucose-Glo Assay-5ml_3
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グルコース濃度のわずかな変化も発光法で検出

  • 様々なサンプルタイプよりグルコースを測定
  • 検出限界は nM レベル
  • シグナル / バックグラウンド比 は >1,000

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選択製品のカタログ番号: J6021

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Glucose-Glo™ Assay
5ml
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生物学的サンプルより迅速、選択的、高感度にグルコースを検出

Glucose-Glo™ Assay は生物学的サンプルよりグルコースを迅速、選択的、高感度に検出する発光アッセイです。発光シグナルは発色法や蛍光法によるグルコースアッセイで起こるシグナルへの干渉がなく、サンプルの調製ステップで除タンパク質も必要ありません。Glucose-Glo™ Assay は解糖系あるいは糖新生におけるグルコース合成でおこるグルコースの消費量変化の検出に最適です。

測定原理

The Glucose-Glo™ Assay はグルコースの酸化とそれにより生成される NADH を発光 NADH 検出システムで測定します。グルコース脱水素酵素がグルコースとNAD+を用いて NADHを産生します。この NADH 存在下でルシフェリン前駆体基質はレダクターゼによりルシフェリンに変換され Ultra-Glo™ Recombinant Luciferase の基質となり発光します。

グルコース脱水素酵素  (GDH)、NAD+、レダクターゼ、レダクターゼ基質およびルシフェラーゼを含む Glucose Detection Reagent をグルコースを含むサンプルに等量加えると酵素カップリング反応が同時に起こります。発光シグナルはサンプルに含まれるグルコース量に比例し、すべてのグルコースが消費されるまで増加し、その後発光シグナルは安定します。

グルコース測定の検出感度と測定レンジ

13887ma-w: Luminescence from glucose assay proportional to metabolite
Glucose titration curve. Serial dilutions of glucose were prepared and assay performed as described in TM494. 

処理数およびワークフローへ容易に対応

Glucose-Glo™ Assay は柔軟性の高いシステムで、ハイスループットフォーマット も可能で、細胞、ライセート、組織、血漿、血清など多くのサンプル種にも対応します。いくつかのサンプルではリニアレンジにフィットさせるために希釈などの前処理が必要な場合もあります。また、内在性の酵素活性の不活化、除タンパク質および NAD(P)H 分解などが必要な場合もありますが、これらの処理を簡便に行う96- および 384 ウェルプレートに対応した方法を提供しており、サンプルの遠心やスピンカラムも使用しません。

 

付着性 肺がん細胞 A549 細胞によるグルコースの消費

13888ma-w: Luminescent glucose assay measured consumption for 72 hours
A549 cells were plated at 5,000 (light blue bars) and 15,000 (dark blue bars) cells/well in medium. Wells with medium only were included as controls. At indicated time points, 2.5µl of medium was removed and diluted. Samples were stored as indicated before assaying as described in TM494. Red line represents luminescence values of medium-only controls.

1つのサンプルより複数の代謝産物を測定 !

細胞内のエネルギー状態で重要な4種類の代謝産物 — グルコース、乳酸、グルタミン酸およびグルタミンを発光アッセイ Glucose-Glo™、Lactate-Glo™、 Glutamine/Glutamate-Glo™ および Glutamate-Glo™ Assay で同時並行で測定することができます。 これら4種の発光アッセイすべてにサンプル処理が対応するため4種すべての代謝物を同一サンプルより検出することができます。これらのサンプル種には培地、血漿、血清および組織などが含まれます。以下のデータは Technical Manual TM494 に従い、同じ培養細胞より取得した培地サンプルを用いて代謝産物を測定したものです。

13836ma-w-a: Glucose consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-b: Lactate secretion measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-c: Glutamine consumption measured in metabolite multiplex assay.
13836ma-w-d: Glutamate secretion measured in metabolite multiplex assay.

利点

様々なサンプル種より迅速に代謝物を測定: 培地、細胞、組織および血漿より測定可能。最小限のサンプル調製ステップだけで、遠心やスピンカラムは不要。

広いダイナミックレンジ: 50µM までの広い直線性を示すためサンプル測定が容易

わずかな変化でも検出: S/Bmax > 1000 のアッセイウインドウを持つので発色法や蛍光法によるアッセイよりもわずかな代謝物レベルの変化を検出

サンプルあたりの情報量を最大限に: 同じサンプルより複数の代謝物を測定でき、細胞生存性試験とのマルチアッセイで補正することも可能

FAQs

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プロトコール

Complete Protocol

製品仕様

You are viewing: J6021 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Concentration

Reductase

 G884A 1 × 55μl 6mg/ml

Reductase Substrate

 G885A 1 × 55μl

Luciferin Detection Solution

 J135A 1 × 5ml

NAD

 J136A 1 × 30μl

Glucose

 J138A 1 × 50μl

Glucose Dehydrogenase

 J140A 1 × 200μl

SDS

Search for SDS

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

製品仕様

You are viewing: J6022 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Concentration

Reductase

 G884B 1 × 275μl 6mg/ml

Reductase Substrate

 G885B 1 × 275μl

Luciferin Detection Solution

 J135B 1 × 50ml

NAD

 J136B 1 × 275μl

Glucose

 J138A 1 × 50μl

Glucose Dehydrogenase

 J140B 2 × 1ml

SDS

Search for SDS

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

AA

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. Nos. 9,273,343 and 9,951,372, European Pat. No. 2751089, Japanese Pat. No. 6067019 and other patents pending.

技術資料

技術記事

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