Lumit® FcRn Binding Immunoassay
Measure Neonatal Fc Receptor Binding
- No wash or transfer: Simple add-mix-read protocol
- Results in less than one hour
- Scalable and high throughput: Perform assays in 96-well or 384-well plates
Catalog Number:
Size
Catalog Number: W1151
Catalog Number: W1152
迅速でシンプルな FcRn アッセイ
Lumit™ FcRn Binding Immunoassay は新規なホモジニアス（洗浄不要）競合アッセイで、ヒト FcRn（胎児性 Fc受容体）と抗体などのFc タンパク質の相互作用を測定します。本アッセイでは LgBiT で標識したヒト IgG1 (Tracer-LgBiT) をトレーサーとして使用します。また、ストレプトアビジン - SmBiT に結合した C末端 ビオチン化 ヒト FcRn (hFcRn-Biotin-SA-SmBiT) を標的として使用します。サンプル中に抗体が存在しなければ Tracer-LgBiT は hFcRn-SmBiT ターゲットに結合し、最大の発光シグナルを生じます。サンプル中に未標識の IgG が含まれている場合、 FcRn ターゲットへの Tracer-LgBiT の結合に対して競合するため、濃度に依存した発光シグナルの減少が観察されます。
FcRn 機能
胎児性 Fc受容体（FcRn）は、血管内皮細胞や抗原提示細胞（APC）など、さまざまな細胞タイプのエンドソームコンパートメントに発現しています。FcRnは、エンドソーム内で酸性pHで免疫グロブリンG（IgG）抗体の Fc 領域に結合します。子宮内では、FcRn は母親の IgG を発育中の胎児に移す働きをします。成人では、IgGとアルブミンのリサイクルに関与しています。FcRnによるリサイクルは、血清中のIgGおよびアルブミンの長い半減期（数週間）の主な理由です。さらに、治療用抗体が成するための重要なポイントの1つは、半減期の延長であり、これにより有効性が向上するとともに長期の投薬スケジュールにも貢献します。そのため、FcRn-IgG 相互作用は、抗体医薬品開発プロセス全体を通じて最適化および追跡するための重要なパラメーターです。
Learn more about the Lumit® FcRn Assay in Nath et al. (2021)
“Deciphering the interaction between neonatal Fc receptor and antibodies using a homogeneous bioluminescent immunoassay” J. Immunol. 207, 1211–21.
シンプルなプロトコル、再現性の高い結果
Lumit™ FcRn Binding Immunoassay は、溶液ベースのホモジニアスアッセイで、洗浄やサンプルの移動ステップを必要としません。
Lumit™ FcRn 結合イムノアッセイ のしくみ
サンプル中に抗体が含まれない場合、Tracer-LgBiT は hFcRn-SmBiT ターゲットに結合し、最大の発光シグナルが得られます。抗体を含むサンプルでは、非標識 IgG は FcRnターゲットへの結合に対して Tracer-LgBiT と 競合するため、結果として濃度依存的に発光シグナルが低下がします。
アッセイパフォーマンスデータ
The Lumit® FcRn Binding Immunoassay detects IgG-FcRn interaction. This is a representative standard curve of control antibody plotted as normalized data. Normalized luminescence is calculated by assigning 100% to the maximum bioluminescent signal obtained in absence of an analyte and then calculating percentage drop in signal in the presence of an analyte.
The Lumit® FcRn Binding Immunoassay can detect dose-dependent, oxidation-based loss in antibody-FcRn affinity. Panitumumab was incubated with 0.3% H2O2 for 0–24 hours to induce methionine oxidation.
For one of our projects we had been using an SPR assay to measure FcRn binding but observed some immobilization artefacts. Now, we use Lumit for the same project and get better data in less time.
Dr. Alwin Reiter, Senior Scientist Project Analytics at Formycon AG
Lumit® FcRn Assay Users Share Their Experiences
In this webinar, hear how users implemented the Lumit® FcRn Binding Immunoassay in product development.
Protocols
Complete Protocol
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
Lumit® Detection Substrate A |
VB301D | 1 × 75μl |
hFcRn-Biotin |
W109A | 1 × 12μl |
Streptavidin-SmBiT |
W110A | 1 × 12μl |
Tracer-LgBiT |
W111A | 1 × 60μl |
FcRn Assay Buffer |
W112A | 1 × 25ml |
pH Adjustment Buffer |
W113A | 1 × 250μl |
Control Antibody |
W114A | 1 × 120μl |
SDS
Search for SDS分析証明書
使用制限
Not For Medical Diagnostic Use.保存条件
Please see the Protocol for detailed storage conditions.
U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
Lumit® Detection Substrate A |
VB301D | 10 × 75μl |
hFcRn-Biotin |
W109A | 10 × 12μl |
Streptavidin-SmBiT |
W110A | 10 × 12μl |
Tracer-LgBiT |
W111A | 10 × 60μl |
FcRn Assay Buffer |
W112A | 10 × 25ml |
pH Adjustment Buffer |
W113A | 10 × 250μl |
Control Antibody |
W114A | 10 × 120μl |
SDS
Search for SDS分析証明書
使用制限
Not For Medical Diagnostic Use.保存条件
Please see the Protocol for detailed storage conditions.
U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.
Resources
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