pRL Renilla Luciferase Control Reporter Vectors

pRL Vector は野生型のウミシイタケルシフェラーゼ (Rluc) のコントロールレポーターベクターです。これらのウミシイタケルシフェラーゼを恒常的に発現するベクターはホタルルシフェラーゼベクターとともに哺乳動物細胞にトランスフェクションしてして使用します。ウミシイタケの発現は内部標準値として実験用のホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子の発現を補正することができます。pRL Vectorには 腔腸動物の花虫綱に属するRenilla reniformis（和名：ウミシイタケ）からクローニングされたウミシイタケルシフェラーゼ (Rluc) をコードするcDNAが含まれます。これらコントロールベクターは４種類のプロモーターから選べ、HSV-チミジンキナーゼプロモーター (pRL-TK) は比較的弱く、特に中程度の恒常的発現を必要とする場合に有用です。初期 SV40 エンハンサー/プロモーター領域 (pRL-SV40) およびCMV 前初期 ンハンサー/プロモーター領域 (pRL-CMV) は通常 高レベルの転写が起こるため頑健な調節エレメントを持つ実験ベクターと併用には適しません。一般的に、使用する細胞で特定のレポーターの組み合わについてパフォーマンステストすることを推奨しています。すべてのpRL Vectorはdam–/dcm–の大腸菌株から精製しており、dam および dcmメチル化に感受性を持つ制限酵素でも消化することができます。

• T7プロモーターはRlucの直前に位置し、ウミシイタケルシフェラーゼのin vitro合成が可能
• Rlucの下流には効率的な転写終結とmRNAのポリアデニル化のためのSV40 late Poly(A) シグナル配列を配置
• 原核生物由来の複製起点とβ-ラクタマーゼ遺伝子により、E.coli 宿主菌株でpRLベクターを選択的に増幅。
• メチル化を避けるためにdam-/dcm- E.coli K宿主菌株から単離

変則的な転写作用を削減した最新型のウミシイタケレポーターベクターについてはpGL4シリーズのページをご覧ください。