pSV-β-Galactosidase Control Vector

pSV-β-Galactosidase Control Vectorは、哺乳動物細胞のトランスフェクション効率をモニタリングするためのポジティブコントロールベクターです。SV40 earlyプロモーターとエンハンサーが、β-ガラクトシダーゼをコードするlacZ遺伝子の転写を制御します。本ベクターだけを用いた単独トランスフェクションや、目的のDNAと一緒に重トランスフェクションを行えます。
β-ガラクトシダーゼは発色法、蛍光法、化学発光法により細胞抽出液から迅速、直接的に定量することのできる優れたレポーター酵素です。また、このレポーター酵素は、基質X-Galを用いたin situでの組織化学的な分析に広く用いられています。

このベクターは目的のDNAとともに重トランスフェクションすることができます。例えば、ルシフェラーゼ遺伝子を持つベクター（pGL3など）とともに重トランスフェクションを行い、その細胞抽出液でルシフェラーゼとβ-ガラクトシダーゼの活性を定量することができます。このようにpSV-β-galactosidase Vectorは一過性の発現解析に内部標準として機能します。内在性の活性を持つ培養細胞でも、擬似トランスフェクション細胞の抽出液をネガティブコントロールとして使用することができます。さらに、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ レポーターベクター(pCAT™3 Vector)と重トランスフェクションすれば、CATとβ-ガラクトシダーゼの両方の活性を測定することができます。

pSV-β-galactosidase Vectorは、pRSV-β-GALを改良（RSVおよびpBR322の配列をSV40およびpUC18の配列に変更）したものです。本ベクターには、lacZ遺伝子の上流に大腸菌gptプロモーターが存在するので、大腸菌でもβ-ガラクトシダーゼを発現します。本ベクターを含む大腸菌をX-Gal含有培地に接種した場合、青色のコロニーを形成します。

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Sequence Information

pSV-β-Galactosidase Vector GenBank® Accession Number X65335 and vector sequence text file.