Nano-Glo® In-Gel Detection System
Directly Detect NanoLuc® Fusion Proteins in Polyacrylamide Gels
- Simply incubate native or SDS denaturing gels with reagent and image
- No transfer to membranes required for detection
- Eliminates the need for blocking or antibodies
Catalog Number:
Size
Catalog Number: N3020
特異的で高感度な発光検出
ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離した NanoLuc® 融合タンパク質をイムノブロッティングを行わずに検出します。Nano-Glo® In-Gel Detection Reagent とインキュベーションした後に直接ゲルをイメージングします。ネイティブ PAGE の場合、ゲルを検出試薬とともにインキュベーションし、15分以内にイメージを取得できます。変性 SDS-PAGE の場合、検出前に SDSを除去してNanoLuc® ルシフェラーゼをリフォールディングさせるために 25% イソプロパノールで2回洗浄し、次に水で2回洗浄します。
NanoLuc® ルシフェラーゼ の感度ならば、Nano-Glo® In-Gel Detection System で可視化するために過剰発現させる必要はありません。
NanoLuc® 融合タンパク質を以下の用途で簡便に検出:
- 様々な発現レベル
- 正確な分子量の確認
- 分子量の異なるNanoLuc® 融合タンパク質のマルチプレックス検出
Overview of the Nano-Glo® In-Gel Detection System.
抗体や膜転写のいらない発光によるタンパク質イメージング
NanoLuc® 付加タンパク質検出の簡便性と特異性を示すために、NanoLuc® と融合させた5種類のタンパク質キナーゼの CMV 発現コンストラクトを HEK293 細胞にトランジェントにトランスフェクションしました。写真のレーン左から右に従って個々のキナーゼ単独から複数のキナーゼを細胞内で発現さました。
キャリア DNA だけをトランスフェクションした細胞では発光バックグラウンドとなるバンドはありませんでしたが、トランスフェクションにより融合タンパク質を発現させたものは予想通りの分子量として検出されました。同じ細胞で異なる NanoLuc® 融合タンパク質からのシグナルを分離できるので複数のタンパク質をマルチプレックスで定量できる可能性があります（例：調節されたタンパク質と一貫した発現を示すコントロールタンパク質のレベル比較）。
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
| Nano-Glo® Luciferase Assay Substrate | N113A | 1 × 200μl |
Nano-Glo® In-Gel Buffer, 10X |
N256A | 1 × 10ml |
BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.
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For uses of Nano-Glo®-branded reagents intended for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer) to acceptors other than a genetically encoded autofluorescent protein, researchers must:
(i) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity by this product; or
(ii) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays to energy acceptors not manufactured by Promega.
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U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.
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