GloMax® Discover マイクロプレートリーダー

発光・NanoBRET®アッセイに最適なマルチモードマイクロプレートリーダーは？

最適な機器は、必要なスループットとワークフローによって異なります。GloMax® Discoverは、6～384ウェル形式でNanoBRET®、BRET、ルシフェラーゼレポーターアッセイを行う研究室に適しています。試薬に合わせたプロトコル、オプションのインジェクター、内蔵のフィルター方式BRET/FRET検出機能を備え、本格的なハイスループットスクリーニング（HTS）向けモノクロメーター搭載システムのような追加コストをかけずに、これらの測定に対応できます。

GloMax® DiscoverはBRETの2波長発光検出に対応していますか？

はい。GloMax® Discoverは、内蔵のフィルターパドルと単一の高感度光電子増倍管（PMT）を用いた、フィルター方式の2色発光検出により、BRETとFRETを測定します。ドナーとアクセプターのシグナルは、同時ではなく順番に読み取ります。このシンプルでコストを抑えた方式は、シグナルが経時的に安定している一般的なBRETアッセイに適しています。

マルチモードリーダーでNanoBRET®アッセイを測定できますか？

はい。約450～600nmの範囲で発光を検出でき、2色検出用の光学系を備えたマルチモードリーダーであれば、フィルター方式でも、2基のPMTによる同時検出方式でも、NanoBRET®アッセイを測定できます。GloMax® Discoverは、内蔵のBRET/FRET用フィルター式発光検出機能を用いて、プロメガのNanoBRET®ターゲットエンゲージメントアッセイおよびタンパク質間相互作用アッセイでの性能が検証されています。

BRETアッセイには2波長発光検出が必要ですか？

はい。BRETアッセイでは、ドナーであるルシフェラーゼの発光と、アクセプターである蛍光色素の蛍光を2つの波長で測定するため、リーダーには2波長の検出機能が必要です。検出方式には、GloMax® Discoverのようなフィルターによる順次検出と、2基のPMTによる同時検出があります。同時検出は測定速度に優れますが、シグナルが経時的に安定している一般的なBRETアッセイの多くでは必須ではありません。

フラッシュ型発光アッセイには試薬インジェクターが必要ですか？

多くの場合、必要です。Dual-Luciferase®アッセイを含むフラッシュ型ルシフェラーゼアッセイでは、基質添加後、数秒以内に発光がピークに達します。そのため、各測定の直前に試薬を分注する機器搭載型インジェクターを使用すると、ウェル間の測定タイミングのばらつきを抑えられます。GloMax® Discoverには、この用途に対応するデュアルインジェクターシステム（分注量範囲：5～200μl）をオプションで用意しています。

ハイスループットスクリーニングには、384、1536、3456ウェルのどのプレートが適していますか？

必要なスループットによって異なります。384ウェルプレートは、日常的なスクリーニングや多くの細胞生物学研究室で標準的に使用されています。1536ウェルおよび3456ウェルプレートは、創薬における超ハイスループットスクリーニングに対応し、ウェル当たりの試薬コストを削減できます。GloMax® Discoverは6～384ウェルプレートに対応しています。1536ウェル形式へのスケールアップを予定している場合は、HTS向けリーダーをご検討ください。

生細胞の発光を経時測定する際、特に重要な機能は何ですか？

安定した温度維持、旋回または直線振とう、短い間隔での経時測定、インジェクターによる試薬添加などが重要です。GloMax® Discoverは、45°Cまでの加温、100～500回/分の振とう、経時測定モードを備えています。ただし、CO₂/O₂濃度の制御機能は搭載していないため、生細胞を数時間以上培養しながら測定するアッセイでは、専用インキュベーターやガス制御機能を備えたHTSプラットフォームが必要になる場合があります。

スクリーニングでルシフェラーゼレポーターアッセイを測定するには、どのリーダーが適していますか？

Dual-Luciferase®、NanoDLR™、Bio-Glo™など、プロメガのレポーターアッセイを標準的に使用している研究室には、これらの測定を想定して設計されたGloMax® Discoverが適しています。70種類以上のプリインストール済みプロトコル、オプションのインジェクター、検証済みの性能により、汎用HTSリーダーを一から設定する場合に比べて、測定準備を効率化できます。