タンパク質の標識

タンパク質の標識および検出は、タンパク質解析において欠かせないステップです。in vitro翻訳の際に比色性または蛍光性の修飾基を持つアミノ酸を組み込むことで、タンパク質を標識し、さらなる解析に使用できます。たとえば、細胞抽出物を使った無細胞発現系で非放射性標識を追加することで、膜ではなくゲル上で標識タンパク質を検出することが可能になります。また、ペプチドタグを用いてタンパク質を標識することもできます。タンパク質のC末端またはN末端にタグを融合させれば、その後の機能解析に活用できます。タグ付きタンパク質は、精製できるだけでなく、抗体ベースの検出（例：ウエスタンブロッティング）、プルダウンアッセイなどにも使用できます。翻訳中にタンパク質がどの程度発現していたのか、あるいはそのタンパク質が細胞内のどこに局在しているのかを把握することは、そのタンパク質が果たす役割を理解するうえで有用です。タンパク質の標識は始まりにすぎません。検出システムを活用することで、どこに、どれくらい存在し、どんな機能を持っているかといった情報を明らかにすることができます。