E. coli S30 Extract System for Circular DNA
本製品は、原核生物のプロモーターとリボゾーム結合部位を含む環状DNAから、簡便に転写/翻訳を行うためのシステムです。この製品はZubayの方法の変法を用いてOmpTエンドプロテアーゼおよびIonプロテアーゼを欠損したE. coli B株から調製されています。そのため、in vivoで発現させた場合にはプロテアーゼで分解されるタンパク質でも、安定して得られる可能性があります。また、in vivoでは宿主がコードするリプレッサーの働きにより低レベルの発現を示すタンパク質でも、S30 in vitroシステムでは高レベルの発現が期待できます。
- 安定性: 発現タンパク質の分解を低減
- 完全なシステム: 転写/翻訳に必要な全ての試薬が付属
- 低バックグラウンド: 内在性のタンパク質に起因するバックグラウンドの低減
- 最適化: Premixは、S30 Extractのロットごとに最適化されており、リボヌクレオチド, tRNA, PEP (ホスホエノールピルビン酸), 塩類などの必要な成分が全て含まれています (アミノ酸を除く)。
- 原核生物の遺伝子発現の制御
- クローン化DNAの遺伝子産物の同定、あるいは特定のDNAフラグメントにコードされるポリペプチドのマッ ピング
- E. coli中で発現効率の高いベクターにクローン化した真核生物あるいは原核生物のDNAを用いた、迅速な翻訳産物のスクリーニング
- 細菌に対する翻訳阻害化合物質のスクリーニング
さらに知りたい方は、プロトコール&ガイド(英語)をご覧ください。
【Q&A】EcoliS30.
- Zubay, G. (1973) Ann. Rev. Genet. 7, 267–87.
- Zubay, G. (1980) Meth. Enzymol. 65, 856–77.
- Pratt, J.M. (1984) In: Transcription and Translation, Hames, B.D. and Higgens S.J., eds., IRL Press, Oxford, 179.
- Studier, F.W. and Moffatt, B.A. (1986) J. Mol. Biol. 189, 113–30.
- Collins, J. (1979) Gene 6, 29–42.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
Amino Acid Mixture Minus Cysteine |
L447A | 1 × 175μl | 1mM | |
|
S30 Extract, Circular |
L464A | 3 × 150μl | ||
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
Luciferase Dilution Reagent |
L487A | 1 × 1ml | ||
|
pBESTluc™ DNA, Circular (Control) |
L492A | 1 × 10μg | ||
|
S30 Premix without Amino Acids |
L512A | 1 × 750μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Leucine |
L995B | 1 × 175μl | 1mM | |
|
Amino Acid Mixture Minus Methionine |
L996B | 1 × 175μl | 1mM | View Product |
Resources
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