E. coli S30 Extract System for Linear Templates
Successful Transcription/Translation of Linear DNA Templates
Catalog Number:
Size
Catalog Number: L1030
Successful Transcription/Translation with a Variety of Templates
本製品は、直鎖状の原核生物のDNAをテンプレートとし、転写/翻訳を連続して行うシステムで、Lesleyらの方法を改良したものです。鋳型DNAとしては、スーパーコイル非感受性のプロモーター (lacUV5, tac, λPL (con) や λPRなど)を持つ必要があります。in vitroタンパク質発現には、リボゾーム結合部位が必要です。大腸菌プロモーターの無いDNAからin vitro合成したRNAも本システムで使用することができますが、収量は直鎖状DNAから直接合成したタンパク質の1-10%に減少します。
- 柔軟性： DNAフラグメント, PCR増幅DNA, 重複オリゴヌクレオチド連結体, in vitro転写RNA, 原核生物RNA（RNAの場合はDNAの約100倍量必要）など、様々なテンプレートを使用可能
- 安定性： 発現タンパク質の分解を低減
- 完全性： 転写および翻訳の両反応に必要な全ての成分を含む
- 低バックグラウンド： 内在性のタンパク質合成に起因するバックグラウンドを低減
- 最適化： Premixは、S30 Extractのロットごとに最適化されており、リボヌクレオチド, tRNA, PEP (ホスホエノールピル ビン酸), 塩類などの必要な成分を全て含む (アミノ酸を除く)
- 直鎖状あるいは閉環状DNAのクローン化遺伝子あるいは合成遺伝子の同定
- 新たなクローニング操作をせずに、迅速な遺伝子の構造マッピングが可能
- in vitro変異導入を短時間で確認
- 機能的なドメインやエピトープのマッピングのため、部分的に削除したタンパク質遺伝子を発現
- 適当なE. coliプロモーターを含まないDNAの場合、in vitro転写RNAからタンパク質を発現
さらに知りたい方は、プロトコール&ガイド（英語）をご覧ください。
【Ｑ＆Ａ】EcoliS30.
- Lesley, S.A. et al. (1991) J. Biol. Chem. 266, 2632–8.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
Amino Acid Mixture Minus Cysteine |
L447A | 1 × 175μl | 1mM | |
|
S30 Extract, Linear |
L480A | 3 × 150μl | ||
|
pBESTluc™ DNA, Linear (Control) |
L485A | 1 × 10μg | ||
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
Luciferase Dilution Reagent |
L487A | 1 × 1ml | ||
|
S30 Premix without Amino Acids |
L512A | 1 × 750μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Leucine |
L995B | 1 × 175μl | 1mM | |
|
Amino Acid Mixture Minus Methionine |
L996B | 1 × 175μl | 1mM | View Product |
Resources
No related resources found
Related Products
類似製品
E. coli S30 Extract System for Circular DNA
環状 DNA を鋳型とした大腸菌ベースの無細胞発現システム
L1020
E. coli T7 S30 Extract System for Circular DNA
T7 プロモーターを含む 環状 DNA を鋳型とする大腸菌ベースの無細胞発現システム
L1130
S30 T7 High-Yield Protein Expression System
簡便でより多くの収量が期待できる大腸菌抽出液を利用した in vitro 転写 / 翻訳システムで、T7プロモーターを含むプラスミドやラムダベクターより発現可能
L1110, L1115
FluoroTect™ GreenLys in vitro Translation Labeling System
無細胞発現タンパク質を蛍光標識するためのシステム
L5001
