E. coli T7 S30 Extract System for Circular DNA

本製品を用いれば、T7プロモーターを含むプラスミドやラムダベクターにクローン化されたDNA塩基配列の転写/翻訳を簡単に行えます。本エクストラクトには、転写用のT7 RNAポリメラーゼと翻訳に必要な全成分が含まれます。そのため、必要となるものはT7プロモーターとリボソーム結合サイトを持ったクローン化DNAだけです。T7 S30 Extract for Circular DNAは、OmpTエンドプロテイナーゼとlonプロテアーゼ活性の欠損したE. coli B株から、Zubayの方法の変法により調製されています。そのため、発現されるタンパク質の安定性が飛躍的に向上し、in vivoではプロテアーゼにより分解されるようなタンパク質でも回収できます。

• 柔軟性： T7プロモーターとリボソーム結合部位を持っていれば、あらゆるクローン化DNAが使用可能（他のS30抽出物であれば、E.coliプロモーターが必要です）
• 安定性： 発現タンパク質の分解を低減
• 完全性： 転写および翻訳の両反応に必要な全ての成分を含む
• 低バックグラウンド: 内在性のタンパク質合成に起因するバックグラウンドを低減
• 最適化： Premixは、S30 Extractのロットごとに最適化されており、リボヌクレオチド, tRNA, PEP (ホスホエノールピル ビン酸), 塩類などの必要な成分を全て含む (アミノ酸を除く)

• 放射性標識タンパク質の合成
• E. coliを用いた組換えタンパク質合成をする前の、 クローン化遺伝子の発現能の確認
• 転写反応や翻訳反応の機能研究
• タンパク質精製におけるトレーサーとしての使用
• 修飾アミノ酸を発現タンパク質に導入する、タンパク質構造研究に利用

さらに知りたい方は、プロトコール&ガイドをご覧ください。

1. Nevin, D.E. and Pratt, J.M. (1991) FEBS Lett. 291, 259–63.
2. Zubay, G. (1973) Ann. Rev. Genet. 7, 267–87.
3. Zubay, G. (1980) Meth. Enzymol. 65, 856–77.
4. Studier, F.W. and Moffatt, B.A. (1986) J. Mol. Biol. 189, 113–30.
5. Pratt, J.M. (1984) In: Transcription and Translation, Hames, B.D. and Higgens S.J., eds., IRL Press, Oxford, 179.