TnT® Coupled Wheat Germ Extract System
Transcription and Translation in a Single Tube
TNT® Coupled Wheat Germ Extract Systemsは、はシングルチューブで転写/翻訳のカップリング反応を行う新しい真核生物系のin vitro翻訳システムです。TNT®は標準的なin vitro翻訳の工程および所要時間を大幅に短縮化します。小麦胚芽抽出液を用いた標準的な翻訳では、SP6またはT7 RNAポリメラーゼを用いてin vitroで合成したRNAを用います。これらの反応は個別に行われ、それぞれ複数のステップを伴いますが、TNT® Systemでは1チューブで2つの反応が同時におこるため、煩雑なステップを省略することができます。さらに、RNA鋳型を用いて小麦胚芽抽出液で翻訳を行う標準的なin vitro翻訳と比べて、TNT® Systemではしばしば2~6倍量ものタンパク質を合成を1.5時間の反応のうちに行うこともあります。
25mM 酢酸マグネシウムと2.5M 塩化カリウムは以下製品で翻訳反応の最適化に使用できます。
TNT® T7 Quick Coupled Transcription/Translation System
Flexi® Rabbit Reticulocyte Lysate System
TNT® Coupled Wheat Germ Extract System
- 確実性:TNT® Systemsは厳密な品質検査をしているため、高レベルの転写/翻訳が可能です。直鎖状(T7のみ)と環状のDNAからタンパク質を合成できます。
- 簡便:転写/翻訳 カップルシステムなので、一般的な小麦胚芽翻訳法で費やすRNAの調製時間を削除できます。 オートラジオグラフィーを用いて、6~8時間以内に翻訳の結果が確認できます。
- 順応性:直鎖状DNAはT7システム、環状DNAはSP6システムで翻訳が可能です。PCR産物にはTNT® T7 Quick for PCR DNA(Cat.# L5540)が最適です。
- 機能的なコントロール:Luciferase Control DNAとLuciferase Assay Reagentが添付されます。完全長ルシフェ ラーゼだけが活性を持つのでコントロールに最適です。
- タンパク質:タンパク質相互作用の研究
- タンパク質の活性研究
- Wheat Germ Extract Systemには哺乳動物の転写因子が含まれないため、特に哺乳動物の転写制御因子の翻訳に最適です。
- タンパク質とDNA, RNAやタンパク質との結合性を研究するためのタンパク質合生成
- 異なったファージポリメラーゼプロモーターを利用した、複数の遺伝子の同時発現
- 迅速なスクリーニングと変異分析
- プロテイントランケーションテスト (PPT)
さらに知りたい方は、 Protein Expressionをご覧ください。
【Q&A】TNT
- Anderson, C.W. et al. (1983) Meth. Enzymol. 101, 635–44.
- Krieg, P.A. and Melton, D.A. (1984) Nucl. Acids Res. 12, 7057–70.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
TnT® Wheat Germ Extract |
L411A | 5 × 200μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Cysteine |
L447C | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Luciferase Assay Wells |
L457A | 1 × 3 each | ||
|
TnT® Reaction Buffer |
L462A | 1 × 90μl | ||
|
Luciferase SP6 Control DNA |
L474A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl | |
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
TnT® SP6 Wheat Germ Polymerase |
L515A | 1 × 60μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Leucine |
L995A | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Amino Acid Mixture Minus Methionine |
L996A | 1 × 50μl | 1mM | View Product |
SDS
Search for SDS分析証明書
使用制限
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.保存条件
See Protocol for detailed storage recommendations.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
TnT® Wheat Germ Extract |
L411A | 5 × 200μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Cysteine |
L447C | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Luciferase Assay Wells |
L457A | 1 × 3 each | ||
|
TnT® Reaction Buffer |
L462A | 1 × 90μl | ||
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
TnT® T7 Wheat Germ Polymerase |
L516A | 1 × 60μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Leucine |
L995A | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Amino Acid Mixture Minus Methionine |
L996A | 1 × 50μl | 1mM | View Product |
|
T7 Linear Control DNA |
P141A | 1 × 10μl |
SDS
Search for SDS分析証明書
使用制限
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.保存条件
See Protocol for detailed storage recommendations.
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
TnT® Wheat Germ Extract |
L411A | 5 × 200μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Cysteine |
L447C | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Luciferase Assay Wells |
L457A | 1 × 3 each | ||
|
TnT® Reaction Buffer |
L462A | 1 × 90μl | ||
|
Luciferase SP6 Control DNA |
L474A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl | |
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
TnT® SP6 Wheat Germ Polymerase |
L515B | 1 × 30μl | ||
|
TnT® T7 Wheat Germ Polymerase |
L516B | 1 × 30μl | ||
|
Amino Acid Mixture Minus Leucine |
L995A | 1 × 50μl | 1mM | |
|
Amino Acid Mixture Minus Methionine |
L996A | 1 × 50μl | 1mM | View Product |
|
T7 Linear Control DNA |
P141A | 1 × 10μl |
SDS
Search for SDS分析証明書
使用制限
For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.保存条件
See Protocol for detailed storage recommendations.
Resources
No related resources available
Related Products
類似製品
S30 T7 High-Yield Protein Expression System
簡便でより多くの収量が期待できる大腸菌抽出液を利用した in vitro 転写 / 翻訳システムで、T7プロモーターを含むプラスミドやラムダベクターより発現可能
L1110, L1115
TnT® SP6 High-Yield Wheat Germ Protein Expression System
高発現タイプの in vitro 転写 / 翻訳 カップリングシステム(小麦胚芽抽出液)。 ハイスループット解析などにも有用
L3260, L3261
TnT® Coupled Reticulocyte Lysate Systems
シングルチューブで行える in vitro 転写 / 翻訳 カップリングシステム(ウサギ網状赤血球ライセート)
L4600, L4601, L4610, L4611, L4950, L5010, L5020
関連製品
in vitro 翻訳システム(小麦胚芽)
Contains components needed for protein synthesis (tRNA, ribosomes, initiation, elongation and termination factors) yet is clear of endogenous amino acids, mRNA and plant pigments to minimize background translation.
L4380
PureYield™ Plasmid Midiprep System
50ml培養液から30分でトランスフェクション品質のプラスミドを最大200µg精製
A2492, A2495, A2496
pCMVTnT™ and pTnT™ Vectors
T7 および SP6プロモーターによる In Vitro 発現またはCMVによる In Vivo 発現が可能なクローニングベクター
L5620, L5610