TnT® Quick Coupled Transcription/Translation System
Single-Tube, Coupled Transcription/Translation for Eukaryotic Cell-Free Protein Expression
- Functional protein is expressed in one hour, ready for use without further purification
- Use protein for protein:protein and protein:nucleic acid interactions, protein modification and more
- Choice of SP6 or T7 promoter
Catalog Number:
Choose a Promoter
Size
Catalog Number: L1170
Catalog Number: L1171
Catalog Number: L2080
Catalog Number: L2081
PCR 断片またはプラスミドDNA からのタンパク質発現
TNT® Quick Systemsは、転写と翻訳を連続して行える、より簡単で迅速な無細胞タンパク質発現システムです。1チューブで供給されるTNT® Quick Master Mixには、in vitro翻訳に必要なあらゆる試薬 (RNAポリメラーゼ、ヌクレオチド、塩、アミノ酸、Recombinant RNasin® Ribonuclease Inhibitor、ウサギ網状赤血球ライゼート）が含まれます（目的DNAと検出用の標識物質を除く)。
TnT® Quick Coupled Transcription/Translation Systemは2種類あり、タンパク質発現を行う遺伝子がT7とSP6のどちらのRNAポリメラーゼプロモーターの下流にクローン化されているかにより選択します。このシステムを使用するにあたり、T7またはSP6プロモーターを含む環状プラスミドDNA、またはT7プロモーターを含むPCR断片をTnT® Quick Master Mixに0.2～2.0μg加え（反応ボリューム50μl）、30℃で60～90分インキュベートします。反応産物はGSTプルダウンやゲルシフトアッセイなど様々な実験への利用に十分な量です。
- 迅速：1回の翻訳反応に1回の分注のみ
- 多様な用途：得られたタンパク質はタンパク質間相互作用、タンパク質-核酸相互作用、タンパク質修飾など
- 信頼性：哺乳類ベースの系であり、大腸菌ベースの系と異なり、翻訳後修飾された可溶性の機能性タンパク質を発現
- 少ないステップ数：発現したタンパク質は精製せずに使用可能
- 柔軟性：環状DNA用、直鎖状DNA用のシステムから選択可能
- GSTプルダウン
- ゲルシフトアッセイ
- 免疫沈降（アニメーションを見る）
- タンパク質修飾のキャラクタリゼーション
- タンパク質-RNA相互作用
- タンパク質活性研究
- 遺伝子産物の確認
- プロテイントランケーションテスト（PTT）
無細胞タンパク質発現についてもっと知りたい方は、Protein Expressionをご覧ください。
【Ｑ＆Ａ】TNT System
【パフォーマンス】昆虫およびウサギの無細胞ライセートを用いた哺乳類タンパク質の発現
【ガイド】RNAアプリケーションガイド
Schematic showing DNA to protein expression in 60–90 minutes.
In Vitro 翻訳システムのアプリケーション
TNT® Transcription/Translation System は、in vitroでのタンパク質翻訳を簡便かつ迅速に行うことができるシステムです。このシステムは、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ（GST）プルダウン、ゲルシフトアッセイ、共免疫沈降、タンパク質修飾、タンパク質：タンパク質、タンパク質：核酸相互作用の特性評価、タンパク質活性研究などを含む多くの下流アプリケーションに有用です。
以下のアニメーションと記事では、これらのアプリケーションのいくつかをより詳細に説明しています。in vitroタンパク質翻訳システムおよびその使用方法の詳細については、Protocols & Applications Guide の「Protein Expression」の章を参照してください。
GST プルダウン
ゲルシフトアッセイ
共免疫沈降
タンパク質修飾の特性化
応用範囲が広がる TnT® Transcription/Translation System
TNT® Transcription/Translation System は、in vitroでタンパク質の翻訳を行うための便利な方法です。これらのシステムは、タンパク質：タンパク質相互作用やタンパク質：DNA相互作用など、多くのダウンストリームアプリケーションに有用です。
この記事では、TNT®システムを利用したいくつかの文献をレビューし 、このシステムが初期のタンパク質翻訳アプリケーションの枠を超えてどのように利用できるかを探ります。
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
Methionine |
L118A | 1 × 50μl | 1mM | |
|
T7 TnT® PCR Enhancer |
L216A | 1 × 100μl | ||
|
Luciferase T7 Control DNA |
L482A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl | |
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
TnT® T7 Quick Master Mix |
L520A | 8 × 200μl | ||
|
Nuclease-Free Water |
P119A | 1 × 1,250μl | View Product |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
|
Methionine |
L118A | 1 × 50μl | 1mM |
|
T7 TnT® PCR Enhancer |
L216A | 1 × 100μl | |
|
Luciferase T7 Control DNA |
L482A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl |
|
TnT® T7 Quick Master Mix |
L520A | 1 × 200μl |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
|
Methionine |
L118A | 1 × 50μl | 1mM | |
|
TnT® SP6 Quick Master Mix |
L209A | 8 × 200μl | ||
|
Luciferase SP6 Control DNA |
L474A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl | |
|
Luciferase Assay Reagent |
L486A | 1 × 250μl | ||
|
Nuclease-Free Water |
P119A | 1 × 1,250μl | View Product |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration |
|---|---|---|---|
|
Methionine |
L118A | 1 × 50μl | 1mM |
|
TnT® SP6 Quick Master Mix |
L209A | 1 × 200μl | |
|
Luciferase SP6 Control DNA |
L474A | 1 × 5μg | 0.5μg/μl |
