タンパク質間相互作用
当社では、タンパク質間相互作用の解析に対応するさまざまな製品をご提供しています。製品ラインアップには、プルダウンアッセイ、BRETベースの検出系、補完型レポーターシステムなどが含まれています。
GSTプルダウンシステムは、細胞抽出物や無細胞発現系を用いた従来の手法で広く活用されています。また、HaloTag® Mammalian Pull-Down Systemは、哺乳類細胞から細胞内タンパク質複合体を単離・同定するために設計されたシステムです。
NanoBRET®およびNanoBiT®テクノロジーは、生細胞内でタンパク質間相互作用を直接解析するための手法を提供します。NanoBRET®システムは、発光共鳴エネルギー移動（BRET）に基づく近接依存型アッセイで、発光性タンパク質ドナーから蛍光タンパク質アクセプターへのエネルギー移動を測定することで、タンパク質間相互作用を検出します。
NanoBiT®アッセイは、NanoLuc®ルシフェラーゼに基づく2つのサブユニットから構成されるシステムにより、細胞内でのタンパク質間相互作用の検出を可能にします。この2つのサブユニットは、それぞれ目的のタンパク質に融合されており、タンパク質同士が相互作用すると、機能性酵素として再構成され、明るい発光シグナルが生成されます。
おすすめのタンパク質相互作用製品
HaloTag® Mammalian Pull-Down Systems
単純あるいは複雑なタンパク質ペアを細胞ライセートより迅速に捕捉し、同じコンストラクトでプルダウン実験だけでなくイメージング実験も可能
G6509, G6500, G6504, G6591
NanoBiT® PPI Starter Systems
生細胞でタンパク質相互作用の検出を行うための相補的レポーター
N2014, N2015, N2016
NanoBRET® PPI Starter Systems
ライブセルPPIアッセイ：BRETベースの相互作用検出に必要なベクター、コントロール、検出試薬を含む
N1811, N1821
タンパク質相互作用の概要
タンパク質間相互作用を解析するための手法は数多くあり、細胞抽出物や生細胞を用いて目的のタンパク質を発現させる方法が一般的に使用されています。
プルダウンアッセイでは、一方のタンパク質（ベイトタンパク質）を融合タンパク質として大腸菌（E. coli）で発現させ、その後、融合タグに特異的なアフィニティーリガンドを用いて固定化します。固定化されたベイトタンパク質に、相互作用相手となるプレイタンパク質をインキュベートして相互作用を検出します。
共免疫沈降（Co-immunoprecipitation）は、タンパク質間相互作用を解析するためのもう一つの方法です。この手法では、標的タンパク質に対する抗体を、Protein AまたはProtein Gを介してSepharose®ビーズに結合させ、抗体結合ビーズを用いて、標的タンパク質を含む複合体を免疫沈降します。
しかし、これらの従来法では、細胞内環境におけるタンパク質同士の相互作用を直接的に評価することはできません。発光共鳴エネルギー移動（BRET）アッセイや補完型アッセイ（complementation assay）を使用することで、生細胞内におけるタンパク質間相互作用を定量的に測定することが可能です。
