本製品は、短時間でmgレベルの2本鎖RNA(dsRNA)を合成するためにデザインされたin vitro転写システムです。合成されたdsRNAにはタンパク質やその他の侠雑物が混入していないので、哺乳動物および非哺乳動物システムにおけるRNA interference(RNAi)の実験に適しています。
本システムは、哺乳動物システムで使用できる21bpのshort interfering RNA(siRNA)および、ヘアピンsiRNAも合成できます。in vitroで合成されたsiRNAは、化学合成されたsiRNAと同等の哺乳動物細胞でのRNA干渉効果があることが示されています。
また、T7 RiboMAX™ Express RNAi Systemは、約200bp以上のdsRNA分子の合成用にデザインされており、非哺乳動物システムにも使用できます。2つの相補的RNA鎖は、鋳型DNA(プラスミドまたはPCR産物)から合成されます。合成された2種類のRNA鎖をdsRNAにするためにアニーリングさせ、残存する1本鎖RNAや鋳型DNAはヌクレアーゼ消化により除去します。dsRNAはイソプロパノール沈殿により精製され、RNAiアプリケーションの標的となる生物に導入することができます。
- 迅速:mg単位のRNAを約30分で合成(他社製品の場合 2~4時間)
- 便利:Transcription BufferにrNTPが含まれており、ピペッティングエラーを抑え、セットアップ時間を短縮します
- 哺乳動物RNA干渉のためのsiRNA二重鎖の合成
- 非哺乳動物RNA干渉のための長鎖dsRNAの大量合成
さらに知りたい方は、プロトコール&ガイド(英語)をご覧ください。
【Q&A】siLentGene.
【パフォーマンス】製品概説(原理、dsRNAの収量)
- Yu, J.-H. et al. (2002) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 6047–52.
- Donze, O. and Picard, D. (2002) Nucl. Acids Res. 20, e46.
Protocols
Specifications
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size | Concentration | Available Separately |
|---|---|---|---|---|
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RNase A Solution |
A797D | 1 × 200μl | 4mg/ml | View Product |
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Sodium Acetate, 3.0M (pH 5.2) |
P135A | 1 × 1ml | ||
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Enzyme Mix, T7 Express |
P132A | 1 × 100μl | ||
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Nuclease-Free Water |
P119A | 1 × 1,250μl | View Product | |
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RiboMAX™ Express T7 2X Buffer |
P164A | 1 × 500μl | ||
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pGEM® Express Positive Control Template |
P256A | 1 × 5μg | View Product | |
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RQ1 RNase-Free DNase |
M610C | 1 × 110u | View Product |