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高い熱・酸化耐性を備えたRNase阻害剤

  • 幅広い温度域でRNase阻害活性を維持
  • 幅広いpH域(pH 5〜8)で多様な真核生物由来RNaseを阻害
  • SP6、T7、T3 RNAポリメラーゼ、GoScript™逆転写酵素、AMVおよびM-MLV逆転写酵素、Taq DNA ポリメラーゼを阻害なし
  • RNA治療薬アプリケーション向けに、動物由来成分不使用(AOF)かつcGMP製造グレードをご用意。 詳しくはこちら
  • 米国内での本製品の使用目的:研究室での使用(GPR)。米国外では、別途記載がない限り研究用途限定。

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概要
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技術資料
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引用文献

RNasin®: RNase阻害のスタンダード

プロメガのRNasin® Ribonuclease Inhibitors はRNase阻害剤のゴールドスタンダードです。RNasin inhibitors は多くの文献に掲載されており、RNaseに対抗するために世界中で最も使用されています。RNasin® Ribonuclease Inhibitors はRNA精製やRT-PCR、in vitro転写などRNaseの混入が懸念される場合にご使用ください。

RNasin® Plus RNase Inhibitor は反応液の調製中にリボヌクレアーゼを阻害します。反応液を70℃、15分間加熱してもリボヌクレアーゼ活性が再び現れることはありません。したがって、RNasin® PlusをRT-PCRの前にあらかじめ添加することで逆転写反応中のRNAの保護を強化することができます。

RNasin® Plus Ribonuclease Inhibitorの特長:

  • RNase A、B、Cおよびヒト胎盤RNaseの阻害
  • 逆転写酵素など、他のRNaseや修飾酵素は阻害しない
  • RNA抽出での収率向上、およびRT-PCR・cDNA合成・マイクロアレイ・in vitro転写/翻訳でのパフォーマンス向上 
  • 酸化・熱に対する高い安定性(70℃、15分まで)
  • サンプルの長期保存に最適
RNAsin is the most trusted name in RNAse inhibition

RNasin® Plusは高温でも安定

RNasin® Plus RNase Inhibitorは、RNase AやRNase Bのような真核生物のRNaseを阻害できる組換え哺乳類RNaseインヒビターで、ヒト型の同タンパク質と類似しています。ヒト胎盤RNaseインヒビターに存在する特定のシステイン残基は、その酵素の酸化感受性に関係していると考えられています(1)。RNasin® Plus RNase Inhibitorはこれらのシステイン残基を含まないため、酸化による損傷に対してより高い耐性を持ちます。RNasin® Plus RNase InhibitorはRNaseと安定な複合体を形成してRNaseを不活性化します。この複合体は70℃で少なくとも15分間安定です(Figure 1)。

RNasin® PlusはRT-PCRで試験されており、ヒト型タンパク質と同様に、AMV、M-MLV、ImProm-II™ Reverse Transcriptaseなどの酵素に加え、TaqおよびTfl DNAポリメラーゼなどの酵素とも適合します。また、TaqMan®アッセイを用いた定量リアルタイムRT-PCRにも適合することが確認されています。さらに、ラット肝タンパク質抽出液のような複雑な生物学的抽出液中でもテンプレートを分解から保護できることが示されており、広範なRNase阻害活性を発揮します(2)。

  1. Kim, B.M., et al. R.T. (1999) Variants of ribonuclease inhibitor that resist oxidation. Protein Sci. 8, 430–4.
  2. Andrews, C. et al. (2003) RNasin® Plus RNase Inhibitor: New Protein for High Temperature RNase Inhibition. Promega Corporation.
Gel image showing RNA samples without RNAse protection 9525TB-W a
図1. RNasin® PlusとRNase Aを組み合わせることで、RT-PCR前のテンプレートを保護できる 1µgのRNAテンプレートに、未加熱のRNasin® Plus 1µl(40ユニット)、未加熱のRNase A 2µl(20ng)、加熱済みRNasin® Plus 1µl、または加熱済みRNase A 2µlを、図に示すとおり組み合わせた。レーン7では、未加熱のRNasin® Plus 1µlと未加熱のRNase A 2µlを混合した後、70°Cで15分間加熱した。調製した反応液5µlをテンプレートとしてRT-PCRに使用した。詳細な実験条件については参考文献2を参照。

RNasin® Plus 由来・ユニット定義・QC・保存バッファー

由来

組換え大腸菌(E. coli.)

 

ユニット定義

1ユニットは、5ngのリボヌクレアーゼA活性を50%阻害するために必要なRNasin® Ribonuclease Inhibitorの量として定義される。活性は、リボヌクレアーゼAによるシチジン2,3´-環状一リン酸の加水分解阻害により測定される。

 

保存バッファー

20mM HEPES-KOH(pH 7.6、4℃)、50mM KCl、8mM DTT、50%(v/v)グリセロール

QCアッセイ

SDS-PAGE/純度、DNase、RNase、潜在性RNase、エンドヌクレアーゼ

製品仕様

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選択製品の構成品内容

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RNasin® Plus RNase Inhibitor

N261A 1 × 2,500u 40u/μl

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For Laboratory Use. Outside of the United States, this product is intended for research use only unless otherwise stated.

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選択製品の構成品内容

Item Part # Size Concentration

RNasin® Plus RNase Inhibitor

N261B 1 × 10,000u 40u/μl

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製品引用文献

この製品を使用した最近の論文紹介

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