CellTox™ Green Cytotoxicity Assay

ここでは、CellTox™ Green DyeをK562細胞と混合し、細胞をプレートに播種した後、化合物を投与しました。72時間の曝露終了時にCellTiter-Glo® Cell Viability Assay試薬を添加し、発光（生存率）を測定しました。これら2つの細胞の健全性に関する逆の指標は、EC₅₀ の一致という結果を示しました。

CellTox™ Greenはカイネティック測定モードで使用することで、細胞毒性の発現開始のタイミングを特定でき、そのあと同じサンプルウェル内でCaspase-Glo® 3/7 Assayとマルチプレックスアッセイを実施することで、カスパーゼ3/7活性化測定の適切なタイミングを調べることができます。

この例では、K562細胞を抗増殖化合物であるメトトレキサートに72時間曝露しました。CellTox™ Green dyeを添加して細胞毒性を評価し、その後、同じサンプルウェルにCellTiter-Glo® 試薬を添加して生存率を測定しました。生存率アッセイのみを用いた場合、非処理対照と比較して処理群の細胞数が少ないため、この化合物を細胞毒性があると誤って報告する可能性がありました。細胞毒性アッセイとのマルチプレックスにより、膜の完全性の損傷によるシグナル変化が見られないことから、これは細胞毒性ではなく、増殖抑制であることが明らかになりました。