Caspase-Glo® 3/7 Assay System
アポトーシス検出用カスパーゼ活性アッセイ
- 高感度カスパーゼアッセイ、少ない細胞数と酵素量で測定可能
- 添加 - 混和 - 測定のシンプルなプロトコルで、サンプル前処理は不要
- 96ウェル・384ウェル・1,536ウェルフォーマットへの容易なスケーラビリティ
- MyGlo™ Reagent Readerとのシームレスな統合運用
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Catalog Number: G8090
Catalog Number: G8091
Catalog Number: G8093
Catalog Number: G8092
カスパーゼ-3/7 活性を測定する発光ホモジニアスアッセイ
Caspase-Glo®3/7 Assayはカスパーゼ3/7活性を測定するためのホモジニアスな発光アッセイです。このシステムは発光前駆体基質であるカスパーゼ-3/7DEVD-アミノルシフェリンおよび特殊な耐熱性ルシフェラーゼを試薬として供給し、カスパーゼ-3/7活性、ルシフェラーゼ活性および細胞溶解に最適化されています。Caspase-Glo®3/7 Reagentを”添加-混和-測定”フォーマットで1回添加すると、細胞溶解および基質のカスパーゼによる切断が起こります。これによりフリーのアミノルシフェリンが遊離し、それが"グロータイプ"の発光シグナルを生じるルシフェラーゼにより消費されます。このシグナルはカスパーゼ-3/7活性に比例します。
安定化ルシフェラーゼと独自のバッファーシステムにより、幅広いアッセイ条件下で優れた性能を発揮します。本アッセイは、蛍光ベースや比色ベースのアッセイと比較して、化合物の干渉を受けにくいという特長があります。このカスパーゼ活性アッセイは、精製酵素または培養細胞を用いたマルチウェルプレートフォーマットでの使用を想定して設計されており、他の細胞ベースアッセイとのマルチプレックス化にも対応しています。また、本アッセイは、細胞系および精製酵素系の両方において優れたZ´ファクター値を示します。
MyGlo™ Reagent ReaderとProNect™データプラットフォームを併用することで、カスパーゼ活性を簡単に可視化できます。
【Q&A】Caspase-Glo® Assay（発光検出） セルベースのカスパーゼアッセイ
【パフォーマンス】少数の細胞で迅速にアッセイできるホモジニアスタイプの Caspase-Glo™ 3/7 Assay
【アプリケーション】
ホモジニアスなセルベースアッセイを用いたマルチアッセイ
上皮性卵巣癌細胞株におけるカスパーゼ活性と 化学物質に対する反応との相関性
UV 照射により誘導された アポトーシスのCaspase-Glo™ 3/7 Assayを用いた検出
細胞生存性試験、カスパーゼアッセイおよびレポーターアッセイを組み合わせたマルチアッセイ
セルベースマルチアッセイの自動化：EnduRen™, CellTiter-Glo®
薬剤開発プロファイリング
細胞生存性試験
【ガイド】実験に即したセルベースアッセイの選び方
【バックグラウンド】生物発光の利点
3D培養でのカスパーゼ活性を測定したい方へ。新製品 Caspase-Glo® 3/7 3D Assay をぜひご覧ください！
発光で手軽にカスパーゼ活性を検出
ワイドレンジのアポトーシスアッセイ
Jurkat細胞に抗Fasモノクローナル抗体を4.5時間処理してアポトーシスを誘導するか、無処理のままとした。Caspase-Glo® 3/7試薬を96ウェルプレート内の細胞に直接添加し、1時間インキュベート後に発光を測定した。各データポイントは4ウェルの平均値を示し、「細胞なし」のブランクコントロール値を差し引いている。
アポトーシス誘導剤に対する用量反応の測定
Jurkat細胞を10,000細胞/ウェルで播種し、2種類の化合物で20時間処理した。その後、Caspase-Glo® 3/7試薬を添加し、MyGlo™ Reagent Reader で発光を測定した。用量反応グラフは、ボルテゾミブに対するアポトーシス応答を示し、パルボシクリブに対してはアポトーシス応答が認められなかった。
カスパーゼ-3/7と細胞毒性・細胞生存率アッセイのマルチプレックス化
Jurkat細胞（10,000細胞/ウェル）にスタウロスポリンを段階希釈して処理した。6時間後に、Caspase-Glo® 3/7アッセイケミストリーを含むApoTox-Glo™ Triplex Assayを用いて、細胞生存率、細胞毒性、アポトーシスを評価した。すべてのデータポイントについて、無処理対照（濃度 = 0M）からのフォールド変化を算出した。
備考
Caspase-Glo®試薬を以下の条件で使用した場合、各製品（カタログ番号）ごとに実施可能なアッセイ回数の目安は以下のとおりです。
◆ 96ウェルフォーマット（1アッセイあたり100μl使用）
G8090：25アッセイ分
G8091：100アッセイ分
G8092 / G8093：1,000アッセイ分
◆ 384ウェルフォーマット（1アッセイあたり25μl使用）
G8090：100アッセイ分
G8091：400アッセイ分
G8092 / G8093：4,000アッセイ分
Pair with the MyGlo® Reagent Reader
Reading your assay results doesn't require a shared plate reader. The MyGlo® Reagent Reader is a compact 96-well luminescence plate reader, enabling you to run luminescent assays at your bench without competing for instrument time. Integrated software generates dose response curves, single concentration and linearity analysis in minutes.
プロトコル
Complete Protocol
製品仕様
Catalog Number:
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810C | 1 × 2.5ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811C | 1 × 1 bottle |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810A | 1 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811A | 1 × 1 bottle |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810A | 10 × 10ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811A | 10 × 1 bottle |
選択製品の構成品内容
| Item | Part # | Size |
|---|---|---|
|
Caspase-Glo® 3/7 Buffer |
G810B | 1 × 100ml |
|
Caspase-Glo® 3/7 Substrate |
G811B | 1 × 1 bottle |
技術資料
技術記事
- Using a Real Time Kinetic Cytotoxicity Assay to Determine when to Detect Apoptosis by Caspase-3/7 Activation
- Profiling Compound Effects on Cell Health Using a Multiplexed Assay
- Elevated expression of miR-494-3p is associated with resistance to osimertinib in EGFR T790M-positive non-small cell lung cancer
- Enhanced extrinsic apoptosis of therapy-induced senescent cancer cells using a death receptor 5 (DR5) selective agonist
- Targeted zinc-finger repressors to the oncogenic HBZ gene inhibit adult T-cell leukemia (ATL) proliferation
- Metformin attenuates rotenone-induced oxidative stress and mitochondrial damage via the AKT/Nrf2 pathway
- Endogenous retroviruses mediate transcriptional rewiring in response to oncogenic signaling in colorectal cancer
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MyGlo® Reagent Reader
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製品引用文献
この製品を使用した最近の論文
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