セルベースおよび生化学アッセイ
プロメガは、HDAC、メチルトランスフェラーゼ、Jumonji脱メチル化酵素およびジオキシゲナーゼ、ならびに各種プロテアーゼ活性の検出に使用できる発光アッセイを提供しています。HDAC-Glo™ アッセイは、試薬1回添加のホモジニアスアッセイ形式で、ヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の相対活性を測定します。Succinate-Glo™ アッセイは、コハク酸を産生するあらゆる酵素に対応しており、添加して測定するだけの簡便な操作で脱メチル化酵素活性を迅速に検出できます。
プロメガはまた、エピジェネティクス研究に関連するタンパク質間相互作用アッセイも提供しています。NanoBRET® ターゲットエンゲージメント HDAC アッセイおよび BET BRD アッセイは、それぞれ HDAC および BET BRD と被験化合物の親和性と滞留時間を直接測定します。
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セルベースおよび生化学アッセイの基礎
セルベースおよび生化学発光アッセイは、HDAC、SIRT、メチルトランスフェラーゼ、脱メチル化酵素、各種プロテアーゼ活性、およびタンパク質間相互作用の検出に使用できます。
ヒストンタンパク質のリジン残基のアセチル化は、ヒストンの正電荷を中和し、負に帯電したDNAとの静電的相互作用を低下させます。この親和性の低下により、タンパク質複合体がDNAにアクセスしやすくなり、遺伝子発現が促進される場合があります。ヒストンのアセチル化は、間接的なメカニズムを通じて遺伝子発現を抑制することもあります。
HDACはヒストンのアセチル化を元に戻し、遺伝子サイレンシングを促進します。HDACは大型タンパク質複合体の構成要素であることが多く、メチル化DNA結合タンパク質によってDNAメチル化部位に動員されます。HDACはサーチュイン(SIRT)を含む4つのクラスに分類されます。
JumonjiCドメイン含有ヒストンリジン脱メチル化酵素(JMJC)は、ヒストンリジンメチルトランスフェラーゼの活性に拮抗することで、ゲノムのエピジェネティック状態の決定に重要な役割を果たします。これらの酵素はイレイサーとして機能し、ヒストンの特定のリジン部位からメチル基を除去することで、標的遺伝子の転写抑制または活性化をもたらします。