Lumit™ イムノアッセイによる代謝調節因子の検出

インスリンとグルカゴンは、代謝研究で測定される主要な分析ターゲットです。膵島のβ細胞とα細胞からそれぞれ分泌される2つのホルモンは、体内のグルコースレベルの調節に関与します。代謝調節因子のための Lumit™イムノアッセイは、スケーラブルな洗浄不要のアッセイプロトコルを使用して、細胞培養サンプル中のインスリンとグルカゴンを定量的に測定します。これらのアッセイは、ハイスループットな灌流（perfusion）アッセイなど、グルコース刺激によるインスリン分泌およびグルカゴン分泌実験からのサンプル処理に最適です。

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Lumit™ 代謝調節因子イムノアッセイの概要

選択性や感度を考慮して選択された一次抗体は、標的を検出するために使用されます。これらの抗体は、NanoBiT®ルシフェラーゼの LgBiT および SmBiT サブユニットで標識されています。標的の存在下で、サブユニットが近接して、活性を有するルシフェラーゼ酵素を再構成します。最適化された基質を添加すると、明るい発光シグナルが生成されます。

Featured Lumit® Assay Citations

In this publication, Tong and Stein use the Lumit® Insulin Immunoassay to investigate of the impact of lipid droplet formation on pancreatic islet cells.

Tong, X. and Stein, R. (2021) Lipid droplets protect human β-cells from lipotoxicity-induced stress and cell identity changes. Diabetes 70, 2595–607.

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In this work, El and colleagues used the Lumit® Glucagon Immunoassay to characterize the complex regulatory mechanisms that control glucagon secretion from alpha cells.

El, K. et al. (2021) GIP mediates the incretin effect and glucose tolerance by dual actions on α-cells and β-cells. Sci. Adv. 7, abf1948.

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利　点

スケーラブルでハイスループット対応 : 96ウェルまたは384ウェルプレートでアッセイボリュームを少量で実施でき、プレコートプレートも不要です。
洗浄なし、移替えなし : 細胞培養でシンプルな "添加 - 混合 - 読み取り" プロトコルを直接実行できます。
迅速な結果: アッセイを開始してからわずか70分後に結果が得られます。
広い直線性: ピコモルからナノモルに渡る広い直線性は、ほとんどの細胞モデルの予想濃度をカバーします。
発光検出: 標準的なプレート形式のルミノメーターを使用し、特別な機器やモジュールは必要ありません。

Using the Lumit® Immunoassay to Detect Hormone Secretion

Insulin and glucagon are key target analytes measured in metabolism research, including Diabetes and Liver Disease Research. Secreted from β- and α-cells of pancreatic islets, respectively, the two hormones are vital for regulating glucose levels in the body.

Using the Lumit® Immunoassays, it is easy to collect hormone secretion data from monolayer cells in culture, 3D islet microtissues and islets. The simple add-and-read protocol is compatible with static and dynamic glucose-stimulated insulin secretion (GSIS) experiments, including perifusion systems.

Quantitate Insulin Secretion from INS-1 Cells

Bar graph showing glucose stimulated insulin secretion in INS-1 cells with increasing concentrations of glucose and in varying cells densities.

Bar graph showing increasing insulin release in INS-1 cells with increasing glucose concentration.

Lumit™ イムノアッセイによるグルコース応答性細胞インスリン分泌のモニタリング. パネル A. 96ウェルプレートにさまざまな個数でデュプリケートに播種したINS-1細胞を、グルコース刺激インスリン分泌実験に使用した。60分後、10µlの上清を384ウェルプレートに移し、Lummit™ Insulin Immunoassay Kitでアッセイしました。エラーバーは+/–1 s.d. パネル B. 10,000細胞/ウェルを使用した同じ実験からのデータでは、グルコースの濃度上昇に伴うインスリンの放出量の増加が示された。

アプリケーション: インスリン検出のための Lumit™ イムノアッセイ

Representative perifusion data showing insulin and glucagon secretion from mouse islets.

Insulin and glucagon secretion were measured in samples collected during perifusion experiments. Briefly, 80 mouse islets were placed in triplicate chambers of a perifusion instrument (Biorep, Miami Lakes, Florida). The islets were treated with 2.7mM glucose and then 10mM glucose, in combination with an amino acid mixture. Perifusate was collected every minute. Ten microliters of each sample were transferred into wells of a 384-well plate and assayed for either insulin or glucagon. Insulin and glucagon data sets are superimposed. This data was kindly provided by Drs. Hannah Foster and Matthew Merrins, University of Wisconsin VA Hospital, Madison, Wisconsin.

代謝ターゲット研究関連資料

糖尿病研究: インスリン活性の測定

インスリンレベルの上昇に応じて測定される一般的なパスウェイのインフォグラフィックとディスカッション。

代謝物の検出アッセイ

解糖およびグルタミノリシス分析のための高感度、非放射性メソッド。

グルコース取込みアッセイ法の比較

グルコースの取込み測定法各種の概要と利点および欠点を解説。

Detect Insulin and Glucagon with Lumit® Immunoassays

Lumit™ イムノアッセイによる代謝調節因子の検出

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Lumit™ 代謝調節因子イムノアッセイの概要

Featured Lumit® Assay Citations

利　点

Using the Lumit® Immunoassay to Detect Hormone Secretion

Quantitate Insulin Secretion from INS-1 Cells

アプリケーション: インスリン検出のための Lumit™ イムノアッセイ

代謝ターゲット研究関連資料

Lumit™ イムノアッセイの詳細

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利 点

Using the Lumit® Immunoassay to Detect Hormone Secretion

Quantitate Insulin Secretion from INS-1 Cells

アプリケーション: インスリン検出のための Lumit™ イムノアッセイ

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