RNA抽出
抽出RNAの純度と完全性は、RT-PCR、RT-qPCR、次世代シーケンシングなどのアプリケーションで効果的に使用するために重要です。プロメガのRNA精製製品は、血液、細胞、組織、FFPE組織、トータルRNA調製物など、多くのサンプルタイプから高品質のトータルRNA、mRNA、miRNAを抽出します。手動精製からハイスループット自動化システムまで、あらゆるサンプルスループットのニーズに対応するRNA精製ソリューションを提供しています。
PureYield™、Reliaprep™、およびSVシステムは、トータルRNAまたはmiRNA用にシングルチューブまたは96ウェルプレートベースの手動精製用のキットを提供しています。 PolyATtract®システムは、トータルRNAまたは粗ライセートからmRNAを単離します。
Maxwell®RSCおよびMaxwell®48の機器とキットは、特定のサンプルタイプに適したカートリッジを用い、1〜48サンプルからベンチトップスケールの自動RNA精製が可能です。 SV 96（シリカメンブレンベース）およびMagneSil®（マグネティックベースの精製）製品は、リキッドハンドラーでのRNAのハイスループット自動抽出を可能にします。
サンプルタイプ別に核酸抽出プロトコルを探す
各キットに付属のテクニカルマニュアルには、特定のサンプルタイプに推奨されるプロトコルが記載されています。プロメガでは現在もさまざまなサンプルタイプに対する検証を継続しており、その結果を短いアプリケーションノートとして公開しています。ご興味のあるサンプルタイプに合わせて、手動法、Maxwellを用いた核酸自動抽出、プレートベース法などのプロトコルをお探しの際は、アプリケーションノートのデータベースをご活用ください。
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RNA抽出の基礎
インタクトなRNAを単離するには、次の4つのステップが必要です。1）細胞または組織の破壊。 2）内因性リボヌクレアーゼ（RNase）活性の不活化。 3）核タンパク質複合体の変性。および 4）不要なDNAおよびタンパク質の除去。 最も重要なステップは、細胞が破壊されたときに膜結合オルガネラから放出される内因性RNaseの即時不活性化です。
RNA精製法は通常、核酸結合にシリカ膜ベース、樹脂ベース、および磁気オプションを使用し、DNase処理を組み込んで、混入しているゲノムDNAを除去します。 次に、精製されたRNAが固体支持体から溶出されます。
RNAは分解の影響を受けやすいことで有名であり、RNaseは至る所に存在します。 多くの市販のRNA精製法には、細胞または組織ライセートに存在するRNaseを不活性化するための特定の化学物質が含まれ、手順全体でのRNA分解を防ぐためのRNase阻害剤が含まれる場合もあります。
