pGEM®-T Vectorでは、T7およびSP6 RNAポリメラーゼプロモーターが、β-ガラクトシダーゼのαペプチドコード領域内にあるマルチクローニングサイト（MCS）を挟んで配置されています。αペプチドへの挿入によってその機能が失活するため、インサートを含む組換えクローンは、指示薬培地での青/白スクリーニングによって直接選別することができます。
このベクターは、f1複製起点（f1 Origin of Replication）を有しているため、一本鎖DNAの調製にも対応しています。
マルチクローニングサイトは、制限酵素BstZIの認識配列で挟まれており、単一酵素による切断でインサートを切り出すことが可能です。また、二種類の制限酵素を用いたダブルダイジェストにより、より柔軟にインサートを切り出すこともできます。
pGEM®-T Vector System IIには、System Iのすべての構成要素に加え、JM109コンピテントセルが含まれています。
参考文献
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Mezei, L.M. and Storts, D.R. (1994) In: PCR Technology: Current Innovations, Griffin, H.G. and Griffin, A.M., eds., CRC Press, Boca Raton, FL, 21.
- Robles, J. and Doers, M. (1994) Promega Notes 45, 19–20.
- Clark, J.M. (1988) Nucl. Acids Res. 16, 9677–86.
- Newton, C.R. and Graham, A. (1994) In: PCR, BIOS Scientific Publishers, Ltd., Oxford, UK, 13.