タンパク質精製

タンパク質精製は、タンパク質の機能を研究するうえで不可欠な工程であり、目的のタンパク質を細胞溶解液などの複雑な混合物から発現・濃縮・精製する一連のプロセスを含みます。この目的において、最も迅速かつ強力な方法がアフィニティ精製です。当社では、HaloTag、GSTタグ、Hisタグなどのアフィニティタグを用いた組換えタンパク質の精製に対応する、各種のタンパク質精製キットおよび試薬をご提供しています。また、Magne® Protein G/Aビーズも取り揃えており、血清、腹水、細胞培養上清からポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を簡便かつ迅速に精製する方法としてご活用いただけます。

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タンパク質精製の基本

タンパク質精製は、個々のタンパク質やタンパク質複合体を分析するための基本的なステップです。大腸菌(Escherichia coli)は、その使いやすさ、迅速な細胞成長、および低コストの培養のために、多くの研究者が組換えタンパク質を生産するための第一選択肢となっています。大腸菌で発現されたタンパク質は比較的高い量で精製できますが、これらのタンパク質、特に真核生物のタンパク質は、適切なタンパク質活性や折りたたみを示さない場合があります。培養された哺乳類細胞は、適切な翻訳後修飾を伴う、正しく折りたたまれた機能的な哺乳類タンパク質を生産するための代替オプションを提供します。

精製を簡素化するために、アフィニティ精製タグを目的の組換えタンパク質に融合させることができます。一般的な融合タグは、組換えタンパク質のN末端またはC末端に追加されるポリペプチド、小さなタンパク質、または酵素です。組換えタンパク質の精製の最初のステップは、細胞溶解液または上清の調製です。分泌タンパク質の場合、最小限の上清調製が必要であり、その後、選択的結合、洗浄、および精製されたタンパク質の溶出が行われます。精製後、プロテアーゼでアフィニティタグを除去することができます。