In Vitro 転写
in vitro 転写製品には、RNA合成システム、核抽出物、リボヌクレオチド、クローニングベクター、および転写、プライマー伸長、遺伝子発現研究をサポートする製品が含まれます。
Riboprobe® Systemsは、高比放射能の一本鎖RNAプローブや、クローン化されたDNAインサートからの配列が既知のRNA転写産物(マイクログラムスケール)を合成する場合に使用されます
RiboMAX™ RNA Production Systemsは、in vitroまたはin vivo 翻訳反応に適した、キャップ付きまたはキャップなしのRNA転写産物を大量に生成するためのシステムです。T7 RiboMAX™ Express Large-Scale RNA Production System は、短時間で大量のRNAを安定的に合成するために設計されたin vitro転写システムです。このキットでは、最大14kbまでの高品質RNAをミリグラムスケールで合成可能であることが実証されています。
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Riboprobe®、RiboMAX™、RiboMAX™ Express Systemの特長とRNA収量の比較
| RiboMAX™ AOF RNA Production System | T7 RiboMAX™ Express Large Scale RNA Production System | RiboMAX™ Large Scale RNA Production Systems | Riboprobe® Systems |
T7 RiboMAX™ Express RNAi System | |
|---|---|---|---|---|---|
| Cat.# | |||||
| Time | |||||
| RNA Yield (per 1ml reaction) | ≥2mg dsRNA |
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| Designed for Optimization | |||||
| AOF/cGMP Reagents | |||||
| Compatible with Modified Nucleotides | |||||
| T7 Promoter | |||||
| SP6 Promoter | |||||
| T3 Promoter | |||||
| Radiolabeling |
NT = not tested.
RNA合成法の概要
in vitro RNA合成法では、T7、T3、SP6などのバクテリオファージ由来DNA依存性RNAポリメラーゼを用いて、DNAテンプレートからRNAを合成します。in vitro 転写反応に使用されるテンプレートDNAには、目的配列の上流にRNAポリメラーゼのプロモーター配列が含まれており、それに対応したRNAポリメラーゼを使って合成RNA転写産物(synthetic RNA transcripts)が作られます。このようにして合成されたRNAは、ハイブリダイゼーションプローブ、in vitro 翻訳のテンプレート、X線結晶構造解析やNMRによる構造研究などの用途に利用されます。さらに、RNA転写産物は以下のようなスプライシング、RNAプロセシング、細胞内輸送、ウイルス感染性の解析、細胞内RNAの機能解析、翻訳過程の研究にも使用されます。