Dual-Luciferase® Reporter Assay System

Part Numbers: E1910, E1960, E1980

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単一サンプルからホタルとウミシイタケ(Renilla)のルシフェラーゼ活性を測定

  • ウミシイタケルシフェラーゼを内部標準として用い、より正確な結果を取得
  • レンジは7桁以上;高活性サンプルであれば通常希釈は不要
  • インジェクター(2本)付きルミノメーターが必要

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選択製品のカタログ番号: E1910

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Dual-Luciferase® Reporter Assay System
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高感度、迅速、便利な Dual-Reporter Assay

Dual-Luciferase® Reporter (DLR®) Assay Systemは、遺伝子発現の測定値を内部コントロールにより補正し、より正確な定量が行えるアッセイシステムです。2種類のルシフェラーゼレポーター酵素を用いて簡便, 迅速, 高感度なシングル チューブ(シングルウェル) /デュアルレポーター方式に統合しました。細胞ライセートあるいは無細胞系翻訳システムを用いて、2種類のルシフェラーゼ、ホタル(Photinus pyralis)ルシフェラーゼおよびウミシイタケ(Renilla reniformis)ルシフェラーゼを短時間に連続して定量することが可能になりました。この2つのレポーターはattomole (<10-18)レベルの感度と優れた直線性を示します。添付のPassive Lysis Bufferは、ホタルルシフェラーゼとウミシイタケルシフェラーゼのレポーター酵素を最も安定かつ効率的に溶解するバッファーです。96ウェルプレートに培養された細胞から、短時間でライセートを調製できます。最初にLuciferase Assay Reagent IIを添加して、ホタルルシフェ ラーゼ(“試験” レポーター用)のアッセイを開始します。ホタルルシフェラーゼの測定が終了した後、直ちにStop & Glo® Reagentをサンプルチューブに添加します。ホタルルシフェラーゼが消光すると同時に、ウミシイタケルシフェラーゼ(“内部コントロール” レポーター用)が活性化されます。この連続したアッセイは、自動分注機を使えば約4秒で完了します。

Dual-Luciferase® Assayで最適な結果を得るために、デュアルルシフェラーゼアッセイでのパフォーマンスが確認されたルミノメーターの使用を推奨しています。 このようなルミノメーターはデュアルアッセイ認定ルミノメーター"DLReady™" として表示されています。 "DLReady™ルミノメーターの詳細についてはDLReady™ Validated Luminometers  をご覧ください。

pGL4 Luciferase Reporter VectorはDLR™ Assay System用として開発されており、通常、恒常的に発現するウミシイタケルシフェラーゼベクターと実験用のホタルルシフェラーゼベクターを哺乳動物細胞に共トランスフェクションして使用します。

備考:Cat.# E1960 / E1980にはPassive Lysis Buffer (1x 30ml)が添付されており、これは96ウェルプレート(20μl/ウェル使用時)で10枚分(約1,000ウェル分)に相当します。より多くのLysis Buffer を必要とするアプリケーション(例えば>100μl/ウェル)で使用する場合は、別売のPassive Lysis Bufferを別途購入する必要があります。 

Q&Aはこちら
【ガイド】実験目的に適したルシフェラーゼシステムの選び方
【ガイド】整合性、統計的有意性向上のための標準化、タンパク質量による補正との違いなど
【サイテーション】ハイスループットスクリーニングへの応用例(文献紹介)

 

 

アッセイの利点

  • 内部コントロールのウミシイタケルシフェラーゼ:優れた精度を実現
  • シングルウェル フォーマット:サンプルを分けて定量する必要がないため、タイタープレートや時間を節約
  • 高感度:低活性プロモーター, 低レベルの発現/制御, 低トランスフェクション効率による低レベルな細胞内発現でも、測定が可能
  • 7桁までの直線性:ルシフェラーゼ活性の高いサンプルでも希釈が不要

製品仕様

You are viewing: E1910 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

Luciferase Assay Substrate

E151A 1 × 1 vial

Passive Lysis Buffer, 5X

E194A 1 × 30ml View Product

Luciferase Assay Buffer II

E195A 1 × 10ml

Stop & Glo® Substrate

E640A 1 × 200μl

Stop & Glo® Buffer

E641A 1 × 10ml

分析証明書

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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BB

製品仕様

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選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

Luciferase Assay Substrate

E151A 10 × 1 vial

Passive Lysis Buffer, 5X

E194A 1 × 30ml View Product

Luciferase Assay Buffer II

E195A 10 × 10ml

Stop & Glo® Substrate

E640A 10 × 200μl

Stop & Glo® Buffer

E641A 10 × 10ml

分析証明書

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

BB

製品仕様

You are viewing: E1980 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size Available Separately

Stop & Glo® Reagent Bottle

E118C 1 × 1 each

Luciferase Assay Substrate

E151C 1 × 1 vial

Passive Lysis Buffer, 5X

E194A 1 × 30ml View Product

Luciferase Assay Buffer II

E195C 1 × 105ml

Stop & Glo® Substrate

E640B 2 × 1.05ml

Stop & Glo® Buffer

E641B 1 × 105ml

分析証明書

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使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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