Luciferase Assay Reagent

Luciferase Assay Systemはホタルルシフェラーゼの定量を高感度、迅速に行うためのシステムです。直線性は酵素濃度で少なくとも8桁以上で、特許を持つ試薬組成により10^–20　moles以下のルシフェラーゼを測定できます。これはクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ (CAT) アッセイの100倍以上の感度です。Luciferase Assay Reagent で生じる光は少なくとも1分間は安定しているため、シングルチューブや自動分注装置付きのマルチウェルプレート用ルミノメーターで測定することができます。

Luciferase Assay System は非ホモジニアスアッセイシステムなので、測定試薬を加える前にルシフェラーゼを含む細胞を溶解する必要があります。哺乳動物細胞を溶解する場合にはGlo Lysis Buffer (カタログ番号 E2661)、Cell Culture Lysis Reagent (カタログ番号 E1531)、Passive Lysis Buffer (カタログ番号 E1941) および Reporter Lysis Buffer (カタログ番号 E3971) を使用することができます。
また、植物細胞または細菌でアッセイする場合はCell Culture Lysis Reagent を使用してください。Reporter Lysis Buffer で調製した細胞抽出液はホタルルシフェラーゼ、CATおよびβ-ガラクトシダーゼのアッセイに使用することができます。キットには細胞溶解剤が添付されているものもありますが、その他については別途ご購入いただく必要があります（各キットの構成品をご確認ください）。

• 直線性: リニアレンジは酵素濃度 8桁以上
• 感度: ルシフェラーゼ 10^–20 moles
• 迅速: 細胞溶解、サンプル調製、アッセイが5分で完了
• 便利: Reporter Lysis Buffer なら同じ細胞抽出液よりルシフェラーゼ、CAT および β-ガラクトシダーゼアッセイが可能
• シンプルな操作: シングルチューブルミノメーターの場合、自動分注装置や素早く試薬を混ぜる操作は必要がありません。
• 柔軟性: ルミノメーターだけでなくシンチレーションカウンターでも測定可能
• 安全: 非放射性
• 高品質: 他社のルシフェラーゼアッセイ試薬よりも高パフォーマンス

Protocols & Applications Guide　もご参照ください。

1. Wood, K.V. (1991) In: Bioluminescence & Chemiluminescence: Current Status, eds. P. Stanley and L. Kricka, John Wiley & Sons, Ltd., Chichester, 543.
2. Seliger, H.H. and McElroy, W.D. (1960) Arch. Biochem. Biophys. 88, 136.
3. Wood, K.V. et al. (1984) Biochem. Biophys. Res. Comm. 124, 592–6.
4. de Wet, J.R. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7870–3.
5. Alam, J. and Cook, J.L. (1990) Anal. Biochem. 188, 245–54.
6. Schenborn, E. and Goiffon, V. (1993) Promega Notes 41, 11–3.
7. Jones, D.P. et al. (1995) Promega Notes 54, 20–5.

Cell Lysis Reagents used with the Luciferase Assay System

The Luciferase Assay System is a nonhomogeneous assay; the cells containing the luciferase must be lysed before reagent addition. Glo Lysis Buffer (Cat.# E2661), Cell Culture Lysis Reagent (Cat.# E1531), Passive Lysis Buffer (Cat.# E1941) and Reporter Lysis Buffer (Cat.# E3971) can be used with the Luciferase Assay System for reporter quantitation in mammalian cells. Reporter Lysis Buffer enables luciferase, CAT and β-galactosidase assays to be performed from the same cell extract. The Luciferase Assay System also can be used for quantitation in plant and bacterial cells, but only Cell Culture Lysis Reagent is suitable for these applications.

In some kits the lysis buffer is included, and in others it must be purchased separately (see the Specifications section of this page to view assay components).

References

1. Wood, K.V. (1991) In: Bioluminescence & Chemiluminescence: Current Status, eds. P. Stanley and L. Kricka, John Wiley & Sons, Ltd., Chichester, 543.
2. Seliger, H.H. and McElroy, W.D. (1960) Arch. Biochem. Biophys. 88, 136.
3. Wood, K.V. et al. (1984) Biochem. Biophys. Res. Comm. 124, 592–6.
4. de Wet, J.R. et al. (1985) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7870–3.
5. Alam, J. and Cook, J.L. (1990) Anal. Biochem. 188, 245–54.
6. Schenborn, E. and Goiffon, V. (1993) Promega Notes 41, 11–3.
7. Jones, D.P. et al. (1995) Promega Notes 54, 20–5.