PCR

エンドポイントPCRから定量的リアルタイムPCRおよびRT-PCRまで、増幅のニーズを満たす高品質な製品を提供します。 エンドポイントおよびリアルタイムPCR製品は、ベーシックPCR、ホットスタートPCR、ロングPCR、qPCR、およびRT-qPCR用の便利なマスターミックス、キット、柔軟な酵素にGoTaq®(Taq)DNAポリメラーゼを搭載しています。

RT-PCRおよびリアルタイムRT-qPCR製品ラインにはGoTaq®DNAポリメラーゼとGoScript™逆転写酵素が含まれており、困難なテンプレートやPCR阻害剤の存在下でも強く、
信頼性の高い逆転写とPCR性能を示します。

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PCRの基礎

PCR、ポリメラーゼ連鎖反応は、分子生物学に革命をもたらしたコア技術です。 PCRでは、DNA分子がターゲットされ、複数回ピーされることでターゲットDNA配列の指数関数的増幅が可能になります。

PCR増幅反応の主要なコンポーネントは、熱安定性DNAポリメラーゼ、デオキシヌクレオチド三リン酸(dNTP)、反応バッファーとマグネシウム、2つのオリゴヌクレオチドプライマー、および、複数回のDNA変性、プライマー結合、DNA伸長を行う反応温度制御サイクリングを可能にするサーマルサイクラーです。

逆転写PCR(RT-PCR)により、RNA配列を調べることができます。 RT-PCRでは、PCRによる増幅の前にRNAターゲットが最初にDNAに逆転写されます。

リアルタイムqPCRは、サンプルのより高感度で定量的な分析が可能です。 qPCRおよびRT-qPCRでは、増幅反応が進行するにつれて、標識反応生成物がリアルタイムで検出されます。 qPCRベースの方法は、ターゲットDNAシーケンスの定量化または遺伝子発現のモニタリングのための標準的な手段です。

特定の目的のために反応を最適化するために、さまざまな熱安定性DNAポリメラーゼのバリエーションがあります。たとえば、ホットスタートPCRでは、変性温度に達するまでDNAポリメラーゼはアクティブになりません。これにより、非特異的な増幅産物の形成が最小限に抑えられ、室温での反応セットアップの利便性が高まります。ホットスタート反応の最も効率的な方法の1つは、抗体を使用してTaqポリメラーゼ活性をブロックすることで実現できます。

長鎖のPCRは、Taq DNAポリメラーゼのような熱安定性ポリメラーゼと、合成されたDNA鎖に誤って組み込まれた塩基を切り出す3´-5´エキソヌクレアーゼ活性のない校正酵素の混合物を使用して達成できます。これにより、より高い精度と長いターゲットシーケンスの生成が可能になります。 Pfuなどの高忠実度熱安定性ポリメラーゼはエラー率が低く、3 'から5'のエキソヌクレアーゼ活性も備えています。