psiCHECK™-2 Vector

Part Numbers: C8021

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RNA 干渉アッセイに最適化されたベクター

  • レポーター遺伝子と融合させた標的遺伝子の発現変化をモニタリング( ルシフェラーゼ活性の減少は RNA 干渉と相関)
  • psiCHECK™-1 Vector は生細胞内における RNA干渉効果のモニタリングに使用
  • psiCHECK™-2 Vector 細胞を溶解するエンドポイントアッセイ用にデザイン

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選択製品のカタログ番号: C8021

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psiCHECK™-2 Vector
20μg
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Convenient Luminescence Signal Monitors RNAi Effect

psiCHECK™-1およびpsiCHECK™-2Vectorは、RNAi実験初期段階における最適化を定量的、迅速に行うためにデザインされています。標的遺伝子と融合されたレポーター遺伝子の発現変化をモニタリングします。両ベクターとも第1レポー ター遺伝子としてウミシイタケルシフェラーゼが利用されており、目的の遺伝子はマルチクローニング領域にクローニングします。目的遺伝子に対する合成siRNAまたはinvivoで発現したshRNA(shorthairpinRNA)によるRNA干渉機構が開始されると、標的遺伝子のmRNAの切断に引き続き、それと融合するウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子のmRNAも分解されます。これにともなうウミシイタケルシフェラーゼ活性の減少を測定することにより、簡便にRNA干渉効果をモニタリングすることができます。GFPやフラッグ-タグなど、その他の融合法によるアプローチと較べ、より便利、迅速に感度の高い定量が行えます。

psiCHECK™-1Vectorは、生細胞におけるRNAi効果のモニタリングに使用することを推奨します。ウミシイタケルシフェラーゼ活性の変化は、細胞内ウミシイタケ発光を持続的にモニタリングできるEnduRen™LiveCellSubstrate(カタログ番号E6481)で測定することができます。この試薬を用いれば、細胞の生理機能を損なうことなくウミシイタケルシフェラーゼの発現を約2日間持続的にモニタリングすることができます。

psiCHECK™-2Vectorは、第2のレポーター遺伝子であるホタルルシフェラーゼ遺伝子も組込まれており、細胞溶解によるエンドポイントアッセイが行えます。ウミシイタケおよびホタルルシフェラーゼ活性はDual-Luciferase®ReporterAssaySystem(カタログ番号E1910)で測定することができます。このホタルルシフェラーゼ遺伝子の導入により、ウミシイタケルシフェラーゼ発現の補正を行うことができ、安定で再現性のある結果が得られます。


  • 経済的: 汎用されるルミノメーターで定量でき、高価な機器は不要
  • 選択性: 生細胞または細胞溶解による測定プロトコル
  • 迅速: 労力と時間を費やすアッセイが不要で、表現型の変化を待つ必要もありません
  • 便利: psiCHECK™-2Vectorを用いれば、トランスフェクションの補正が簡単

  • RNAi効果の検定

 Protocols & Applications Guide. も併せてご参照ください。


【ライセンス】 Luciferase Vector

psiCHECK™ Vector Advantages for RNAi Optimization

  • Convenient RNAi target evaluation.
  • Quantitation is performed with a common luminometer; no need to purchase expensive equipment.
  • Protocols allow for measurement in live cells or crude cell lysates.
  • No labor-intensive, time-consuming assays or waiting for phenotypic changes.
  • No need for transfection normalization when using the psiCHECK™-2 Vector.

Mechanism of action of the psiCHECK™ Vector.

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psiCHECK™-2 Vector

4345MA-W

プロトコール

製品仕様

選択製品の構成品内容

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psiCHECK™-2 Vector

C802A 1 × 20μg

分析証明書

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For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

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BB

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