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Lumit® Glucagon Immunoassay

Part Numbers: W8020, W8022

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洗浄不要なグルカゴン検出イムノアッセイ

  • 迅速な"添加"-"測定"フォーマット
  • プレートタイプのルミノメーターによる発光検出
  • 柔軟かつスケーラブルなスループット：W8020は96ウェルフォーマットで100アッセイまたは384ウェルフォーマットで400アッセイ、W8022は500~2,000アッセイ分が含まれます。

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選択製品のカタログ番号: W8020

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Lumit® Glucagon Immunoassay
100–400 assays
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面倒な洗浄ステップなしでグルカゴンの分泌を検出

Lumit® Glucagon Immunoassayは、細胞培養液または膵島分泌サンプル中のグルカゴンを、迅速かつ簡単な洗浄不要プロトコルで定量的に測定します。サンプルにLumit®試薬を添加し、インキュベート後、標準的なマルチモードプレートリーダーで読み取るだけで、結果はわずか70分で得られます。Lumit®アッセイは、膵島ペリフュージョンワークフローにおけるホルモン分泌の定量に最適です。さらに、柔軟なアッセイフォーマットは384ウェルプレートにスケールアップできるため、高スループットなサンプル処理が可能です。

Lumit® Glucagon Immunoassayの仕組み

グルカゴンに対する一次抗体は、その高い特異性と感度を基準に選定され、NanoBiT®ルシフェラーゼのLgBiTおよびSmBiTサブユニットで標識されています。グルカゴンの存在下で、これらのサブユニットは集結し、活性なルシフェラーゼ酵素が再構成されます。最適化されたルシフェラーゼ基質を添加すると、分析対象の量に比例した明るい発光シグナルを発します。
How the Lumit™ Glucagon Immunoassay Works

シンプルな1プレートプロトコル、洗浄不要！

Lumit™ Glucagon Immunoassay Workflow

各プレートの推奨液量

Plate Format

Glucagon Sample
Volume

Total Reaction
Volume

Number of Assays
(Cat.# W8020)

Number of Assays
(Cat.# W8022)

96-Well

50µl

125µl

100

500

384-Well

12.5µl

31.1µl

400

2000

Lumit®アッセイのセットアップは非常に柔軟で、ご希望に合わせてスケールアップまたはスケールダウンが可能です。上記に示した構成に加え、適切な割合のLumit®試薬を使用すれば、試料量が5µl以上のいずれのサンプルにも対応できます。詳細については、 Lumit® Glucagon Immunoassay Technical Manual (#TM682)の表1をご覧ください。

Lumit® Glucagon Immunoassayの広いダイナミックレンジ

Lumit® Glucagon Immunoassay の幅広いリニアレンジは、ほとんどの細胞モデルおよび膵臓サンプルに対応します。

Representative Titration Curve of Glucagon Positive Control

Specification

Lumit® Glucagon Immunoassay

Limit of Detection (LOD)

~1pM (3.4pg/ml; 3 SD above background)

Linear Range

1pM–2nM

Signal/Background max

~500

Assay Time

70 minutes

Sample Type

Cell culture supernatants
Islet secretion samples

SD=Standard Deviation

ご注意: Lumit® Glucagon Immunoassay kitにはポジティブコントロールが含まれておりません。アッセイで使用するポジティブコントロール調製手順は本製品プロトコル（TM682）に記載されています。

Lumit® Immunoassayのアプリケーション

インスリンおよびグルカゴンは、代謝研究で測定される主要なターゲットです。膵島のβ細胞およびα細胞からそれぞれ分泌されるこれらのホルモンは、体内のグルコース濃度の調節に不可欠な役割を果たします。Lumit® Insulin および Lumit® Glucagon Immunoassaysを使用すれば、培養中の単層細胞、3D膵島マイクロ組織、そして膵島からのホルモン分泌データを簡単に収集することができます。シンプルな添加読み出しプロトコルは、静的および動的なグルコース刺激インスリン分泌（GSIS）実験、さらにはペリフュージョンシステムにも対応しています。

ペリフュージョン法は、時間の経過や連続的な処理に対するホルモン分泌を解析するための強力な手法であり、解析対象となる多数のサンプルを生成します。Lumit® Immunoassayは、煩雑な洗浄工程を回避することで、このような大量サンプルの解析を大幅に簡易化します。迅速な結果取得により、早期にデータが得られ、次の実験へとすぐに移行できるメリットがあります。

マウス膵島からのインスリンおよびグルカゴン分泌の定量

Representative perifusion data showing insulin and glucagon secretion from mouse islets.
ペリフュージョン実験中に収集されたサンプルを用いて、インスリンおよびグルカゴンの分泌が測定されました。簡単に説明すると、80個のマウス膵島をペリフュージョン装置（Biorep, Miami Lakes, Florida）の各トリプルチャンバーに配置しました。膵島は、まず2.7mMのグルコース、その後10mMのグルコースとアミノ酸混合物の組み合わせで処理されました。ペリフュージョン液は毎分採取され、各サンプル10µlずつを384ウェルプレートの各ウェルに移し、インスリンまたはグルカゴンのアッセイを実施しました。インスリンとグルカゴンのデータセットは重ね合わせて表示されています。このデータは、ウィスコンシン大学VA病院（Madison, Wisconsin）のDr. Hannah FosterおよびDr. Matthew Merrinsのご厚意により提供されました。

注目の引用文献

本研究では、ElらがLumit® Glucagon Immunoassayを用い、α細胞からのグルカゴン分泌を制御する複雑な調節機構を明らかにしています。

El, K. et al. (2021) GIP mediates the incretin effect and glucose tolerance by dual actions on α cells and β cells. Sci. Adv. 7, abf1948.

Interview with the Author Read the Paper
lumit-glucagon-paper

プロトコール

Complete Protocol

製品仕様

You are viewing: W8020 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

 VB405A 1 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

 VB406A 1 × 3.2ml

Lumit® Antibody Dilution Buffer B

 W150A 1 × 5.5ml

Lumit® Anti-Glucagon mAb-SmBiT, 400X

 W155A 1 × 15μl

Lumit® Anti-Glucagon mAb-LgBiT, 400X

 W156A 1 × 15μl

SDS

Search for SDS

分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

BB

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

製品仕様

You are viewing: W8022 Change Configuration

選択製品の構成品内容

Item Part # Size

Lumit® Detection Substrate B

 VB405A 5 × 160μl

Lumit® Detection Buffer B

 VB406A 5 × 3.2ml

Lumit® Antibody Dilution Buffer B

 W150A 5 × 5.5ml

Lumit® Anti-Glucagon mAb-SmBiT, 400X

 W155A 5 × 15μl

Lumit® Anti-Glucagon mAb-LgBiT, 400X

 W156A 5 × 15μl

SDS

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分析証明書

Search by lot number

使用制限

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

保存条件

BB

パテントおよび免責条項

U.S. Pat. No. 8,809,529, European Pat. No. 2635582, Japanese Pat. No. 5889910 and other patents and patents pending.

U.S. Pat. Nos. 9,797,889, 9,797,890, 10,107,800 and 11,493,504; European Pat. No. 2970412; Japanese Pat. Nos. 7280842 and 7532562; and other patents and patents pending.

技術資料

技術記事

その他

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