糖尿病
糖尿病研究に適した簡便で信頼性の高いホルモン分泌や細胞代謝を測定するための手法を提供します。
製品には、インスリンやグルカゴンの分泌、グルコースの取り込み、糖新生、脂肪新生などの代謝活動をモニターするプレートベースのアッセイキットが含まれます。プロメガ社のアッセイに使用されている発光検出技術は、他の方法よりも高感度な検出を可能にし、簡単なプロトコルにより時間を節約、すぐに次の実験に進むことができます。
プロメガ社が糖尿病研究にどのようにお役に立てるか、下記の製品とリソースをご覧ください。
糖尿病研究のための Lumit® Immunoassays
インスリンとグルカゴンを検出するELISA代替法
膵細胞や膵島から分泌されるインスリンやグルカゴンの検出は、一般的なELISAやRIAでは多くの工程と労力を要します。ホモジニアスイムノアッセイは、必要なステップを減らし、灌流実験から得られる数百または数千のサンプルのような、多数のデータポイントに対応できるスケーラビリティを備えています。
Lumit®テクノロジーを使用すれば、細胞ベースの分泌実験からわずか70分で高品質のデータを得ることができます。プロトコルはシンプルで、洗浄や移動のステップがなく、アッセイフォーマットはプレートサイズやスループットのニーズに合わせて拡張可能です。Lumit®アッセイを使えば、午前中にハイスループットのグルコース刺激インスリン分泌（GSIS）実験を行い、午後にはインスリンとグルカゴンの分泌データを解析することができます。
Lumit® Immunoassay の原理. 一次抗体は、特異性と感度によりに選択され、目的の分析物を検出するために使用されます。この抗体はNanoBiT® LuciferaseのLgBiTおよびSmBiTサブユニットで標識されています。分析対象物の存在下で、各サブユニットを結合させ、活性のあるルシフェラーゼ酵素が再構成されます。最適化されたルシフェラーゼ基質を添加すると、明るい発光シグナルが発生します。
注目のLumit® Assay
この研究では、El博士らはLumit® Glucagon Immunoassayを用いて、α細胞からのグルカゴン分泌を制御する複雑な制御機構を明らかにしました。
El, K. et al. (2021) GIP mediates the incretin effect and glucose tolerance by dual actions on alpha cells and beta cells. Sci. Adv. 7, abf1948.
糖尿病研究のための方法の検証と3D膵島マイクロティッシュ
Insphero社との共催によるこのウェビナーでは、3D膵島細胞培養モデルと3Dアプリケーションに最適化されたアッセイを用いて、解決可能な糖尿病研究におけるいくつかの課題を取り上げています。
細胞内のインスリン活性を測定するための簡便でロバストなアッセイ法
インスリン濃度への応答として観察される一般的なパスウェイ
脂質産生: トリグリセリドやその他の脂質分子の生成は、インスリンに反応して脂肪細胞や肝細胞で亢進されます。このように、インスリンは貯蔵促進ホルモンとして作用します。インスリン濃度の上昇は、細胞にエネルギー（グルコース）が豊富であること、貯蔵すべきであることを示します。トリグリセリド濃度の上昇は、 Triglyceride-Glo™ Assayで測定可能です。
脂質分解: 脂肪分解とは、トリグリセリドをグリセロールと3つの脂肪酸の分子に分解することです。インスリンは脂質分解を抑制するため、インスリン濃度が高い時には細胞はグルコースを優先的に使用します。脂肪分解の結果、グリセロール分子が増加します。グリセロールの濃度は Glycerol-Glo™ Assayで測定可能です。
糖新生: グルコースの新しい分子の生成は、インスリン濃度が高い細胞では抑制さ れます。グルコースが上昇している状態ではインスリンが上昇しているため、インスリンは細胞に、これ以上グルコースを作らず、むしろ存在するグルコースを消費するようにシグナルを送ります。グルコースの濃度は Glucose-Glo™ Assayで測定可能です。
グルコース取り込み速度: インスリンは、グルコーストランスポーターを介して細胞がグルコースを取り込む速度を増加させます。これにより、細胞は貯蔵と消費のためにグルコースを取り込むことができます。Glucose Uptake-Glo™ Assayは、グルコース取り込み速度の増加を測定するために使用できます。
GLUT4の移行: インスリンの存在下でGLUT4トランスポーターは細胞膜に移動し、細胞によるグルコースの取り込みを促進します。GLUT4は主に脂肪細胞と筋肉細胞に存在します。
グリコーゲン合成: グルコースのポリマーであるグリコーゲンは、主要な炭水化物の貯蔵形態です。インスリンは、筋細胞および肝細胞でのグリコーゲンとしてのグルコース貯蔵を亢進します。Glycogen-Glo™ Assayはグリコーゲンの増加を測定するために使用できます。
Scientific Poster: Bioluminescent Assays for Studying Insulin Biology
Bioluminescent Assays for Studying Insulin Biology
Presented by Donna Leippe, Sr. Research Scientist
エネルギー代謝アッセイ
プロメガは、グルコース、乳酸、グルタミン酸、酸化ストレス、ジヌクレオチド検出アッセイなど、代謝活性を測定するための使いやすいプレートベースアッセイの広範なポートフォリオを提供しています。生物発光検出技術を用いたこれらのアッセイは、代謝変化の最も高感度な測定が可能であり、細胞代謝を研究するための強力な研究ツールです。
糖尿病研究に関する記事とウェビナー
トリグリセリド代謝研究のためのホモジニアスアッセイ
洗浄工程や有機抽出を必要としない、シンプルな生物発光トリグリセリドおよびグリセロールアッセイについて学ぶ。
グルコース取り込み測定の手法比較
この論文では、グルコース取り込みを測定するために利用可能な様々な方法について説明し、各測定法の利点と欠点を挙げています。
専門家に聞く: Eエネルギー代謝アッセイ
このウェビナーでは、当社の研究者が細胞代謝アッセイの実施に関する質問にお答えします。